宫颈癌前病变应用P16/Ki—67免疫细胞化学双染检查的诊断价值(2)
1资料与方法1.1一般资料
选择2016年5月~2017年3月来我院就诊的宫颈癌前病变患者900例,均予以宫颈液基细胞学(TCT)检查、HPV检查,病理活检结果确诊,每位女性均接受P16/Ki-67免疫化学双染法检测、TCT检查、HPVDNA检测,根据世界卫生组织2014年《女性生殖器官肿瘤分类》标准分级,年龄23~59岁,平均(40.2±3.4)岁。文化程度:高中及以上学历者535例,初中及以下学历365例。排除标准:妊娠期、生理期、接受盆腔放射疗法患者。本研究经我院医学伦理委员会批准,参与研究者均知情同意。
1.2方法
P16/Ki-67细胞学双染方法由福州迈新生物技术开发公司提供的细胞学P16/Ki-67双染试剂盒。细胞薄片置于95%的乙醇中30 min,流动水冲洗1 min,应用EDTA8.0系统在95°C温度下热修复标本20 min,滴加100 ul过氧化物酶,室内常温孵育10 min,滴加Ki-67抗体、P16抗体组合,室温下孵育1 h,滴加100 μl显色剂DAB,常温下5 min孵育。苏木素染色,应用乙醇梯度脱水,中性树胶固封。进行HPVDNA检验 ......
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