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编号:13297696
亚临床甲状腺功能减退症稽留流产患者绒毛蜕膜组织中MMP—9、TSP—1的表达及临床意义分析(2)
http://www.100md.com 2018年6月5日 《中国当代医药》 2018年第16期
     1.2方法

    ①标本采集及处理:两组均在行人工流产手术时收集绒毛蜕膜组织,用0.9%氯化钠溶液冲洗后即刻放置于10%的甲醛溶液中,12~36 h后包埋于石蜡中,4 μm厚度切片,常规HE染色。②免疫组化法:将组织切片置于60℃恒温箱中烤片20 min,用二甲苯将切片脱蜡;梯度乙醇脱水后用蒸馏水浸泡,行抗原修复;滴加3%过氧化氢室温孵育20 min以消除内源性过氧化物酶活性;二抗使用免疫组化试剂盒,进行DAB显示,苏木素复染,常规脱水,透明封片。③MMP-9阳性评判标准[4]:显微镜下拍照,每张切片于400倍镜下随机选择5个视野,每个视野计数100个细胞;以细胞质中出现明显棕黄色颗粒为阳性细胞,无着色或背景颜色一致则判定为阴性细胞;计算阳性细胞数目,换算成百分数取平均值;根据百分比计分,0%为0分,1%~25%为1分,26%~50%为2分,51%~75%为3分,76%~100%为4分;根据细胞着色强度计算强度得分,无着色为0分,浅棕色为1分,棕褐色为2分,深棕褐色为3分;阳性得分和强度得分相乘得总分,0分为阴性(-),1~3分为弱阳性(+) ......
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