1.2.2免疫细胞化学试剂 兔抗人Midkine抗体购自北京北方生物技术研究所有限公司；兔超敏二步法免疫组化检测试剂盒(PV9001)及二氨基联苯胺显色液均购自北京中杉金桥生物技术有限公司；苏木素购自江苏凯基生物技术有限公司。

    1.2.3免疫细胞化学实验方法 于冰箱中取出细胞涂片，置室温10～15 min复温。经蒸馏水洗涤后，在柠檬酸盐缓冲液pH6.0中抗原热修复20 min。3%过氧化氢室温孵育10～20 min，阻断内源性过氧化物酶，PBS缓冲液冲洗3 min×3次。滴加牛血清白蛋白封闭，室温孵育20 min。滴加100倍稀释的一抗兔抗人Midkine抗体4℃过夜，PBS缓冲液冲洗3 min×3次。置于37℃水浴锅内复温45 min。滴加反应增强液，37℃孵育20 min，PBS缓冲液冲洗3 min×3次。滴加增强酶标山羊抗兔IgG聚合物，37℃孵育20 min，PBS缓冲液冲洗3 min×3次。二氨基联苯胺显色5 min，双蒸水冲洗。苏木素复染，梯度乙醇脱水，二甲苯透明，中性树胶封片观察。用已知阳性切片作阳性对照 ......