1.2实验方法

    1.2.1 30肽的表达及纯化 参考Wang等[3]的纯化方法，从构建的pTYB2-T30基因工程表达菌中提取30肽，经几丁质亲和层析纯化后，通过Tricine-SDS-PAGE电泳鉴定其纯度。

    1.2.2 30肽对HepG2细胞生长和活力的抑制实验 常规方法培养HepG2细胞，用0.25%的胰酶消化处于对数生长期的细胞，计数活细胞后，在96孔板中接种相同数量的HepG2细胞(每板留1个孔用作空白对照孔)。37℃，5%CO2培养箱中孵育过夜，向各孔中分别加入30肽(浓度分别为0、20、40、60、80、100 μg/ml，每个浓度设5个复孔)，37℃孵箱中分别处理24、48 h，弃培养基，PBS冲洗，每孔加入100 μl无血清培养基和10 μl WST-1，37℃孵育1 h。选择450 nm为测定波长，630 nm为参考波长，用酶标仪在570 nm处测定各孔吸光度值。

    1.2.3 30肽对HepG2细胞异型黏附能力的影响 本实验将Matrigel铺于96孔细胞培养板中 ......