1.2研究方法

    使用芬兰PE公司提供的苯丙氨酸测定试剂盒(茚三酮荧光法)进行检测。具体操作如下。①使用打孔器将血斑标本依次打入板孔中。②使用移液器在每孔中加15 μl 萃取液，室温慢速振荡2 h，放入2～8℃冰箱孵育18～22 h。③每孔加入40 μl去离子水，室温慢速振荡20 min，每孔取25 μl转移至反应板，并加入50 μl茚三酮试剂，37℃孵育120～140 min。④孵育结束后每孔加入200 μl铜试剂慢速振荡5 min，室温放置3 h后上机检测。

    1.3结果判断

    对血斑标本进行处理后，使用配套仪器1420 Victor 2D多标记荧光分析仪对样本进行检测，以检测值>阳性切值2 mg/dl视为初筛阳性；对初筛阳性标本行重新采血复查，结果仍>2 mg/dl视为筛查阳性，并进行鉴别诊断，包括串联质谱、尿蝶呤谱分析、红细胞二氢蝶呤还原酶活性测定、四氢生物蝶呤(BH4)负荷实验、基因检测(对PAH基因外显子1-13编码区及前后10 bp的剪切区分别进行PCR扩增并Sanger测序) ......