1.2.2检测方法与步骤 采用qRT-PCR法检测患者的BCR -ABL转录本水平，具体步骤如下。①RNA提取：抽取患者空腹静脉血5 ml置于EDTAK2抗凝管中，混匀，加入人淋巴细胞分离液分离白细胞，加入TRhol试剂裂解白细胞，经氯仿萃取出核酸，并利用异丙醇沉淀提取RNA。②RT-PCR反应：将RNA反应管、DEPC-H20反应管、对照品和标准品反应管置于qRT-PCR仪中进行扩增，循环参数：45℃，20 min;95℃，5 min;95℃，15 s;58℃，60 s;循环45次。设立阳性对照和阴性对照，内参基采用ABL。③计算标准曲线：利用标准品qRT-PCR反应扩增的结果制作出标准曲线。④计算样本BCR-ABL水平：通过样本Ct值和标准曲线计算出样本起始BCR-ABL值和ABL值，选取ABL≤38的样本，根据以下公式计算BCR-ABL水平。BCR-ABL(%)=(BCR-ABL拷贝数/ ABL拷贝数)×100%。上述各项操作和步骤均按照仪器和试剂盒说明严格规范操作 ......