[摘要]目的 筛选出小鼠原代肝细胞中PTEN基因沉默所需的高效siRNA。方法 采用两步胶原酶灌注法分离小鼠原代肝细胞，放入25 cm2胶原包被瓶中(1×106个/瓶)，均分为5组：对照组(C组)、阴性对照组(NC组)、siR-996组、siR-1381组、siR-1519组。采用HiPerFect转染试剂将各组对应的siRNA序列转入小鼠原代肝细胞，24 h后提取RNA和蛋白，通过Real-time PCR检测各组PTEN mRNA表达，通过Western blot检测各组PTEN蛋白含量。结果 siR-996组、siR-1381组和siR-1519组的PTEN蛋白含量低于NC组，差异有统计学意义(P<0.01)，siR-996组、siR-1381组和siR-1519组的PTEN mRNA水平低于NC组，差异有统计学意义(P<0.01)。siR-996组的PTEN蛋白含量及PTEN mRNA水平最低 ......