Arpin蛋白在前列腺癌中的表达及临床意义(2)
1资料与方法1.1一般资料
收集2013年1月~2014年9月在青岛市市立医院行PCa根治手术的136例患者的临床资料,另收集120例行前列腺电切手术的前列腺增生患者的临床资料。收集的所有病理均经组织学证实。研究对象的纳入标准:①PCa患者术前均未接受放化学治疗,无远处转移及其他器官肿瘤。②前列腺增生患者术前均未行相关药物治疗,无其他器官肿瘤病史。
1.2免疫组织化学(immunohistochemistry,IHC)染色
对4 μm厚的10%甲醛固定及石蜡包埋的组织进行染色。将标本煮沸 3 min,然后在标本中加入3%的过氧化氢溶液,置于室温孵育 10 min,用缓冲液冲洗样品,并与Arpin (sc-242049)特异性的山羊多克隆抗体孵育。最终稀释到 1∶25,放入 4℃冰箱中孵育 24 h。之后再由缓冲液清洗3次。用生物素标记抗山羊免疫球蛋白作为第二抗体。最后,用3、3 -二氨基苯胺四氢氯化物和过氧化氢对切片进行水洗和染色,用苏木精进行复染后得到褐色色素 ......
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