哇巴因体外逆转肝癌耐药Bel-7402/ADM细胞的实验研究(3)
哇巴因[11-12]是细胞膜上钠钾泵(Na+/K+-ATP ase)抑制剂,钠钾泵作为细胞膜上ATP酶,通过消耗ATP可以将细胞外低浓度K+纳入细胞内,并将细胞内低浓度Na+外排出细胞,维持细胞膜两侧钠钾浓度,保持细胞处于静止电位,帮助传输和调整细胞体积。研究表明[13],P-糖蛋白(P-glycoprotein,P-gp)是MDR基因编码重要跨膜转运蛋白,广泛分布与全身各个器官及组织,参与药物体内转运。可利用ATP水解能量将疏水亲脂性化疗药物(如ADM)在尚未发挥作用时排出细胞,导致细胞耐药性。而P-gp外排需要依赖ATP水解能量,哇巴因[14]可通过与钠钾泵特异性结合抑制其ATP酶功能,导致细胞内ATP分解减少,Na+浓度上升,引起细胞膜超极化,Ca2+内流,其浓度升高,阻断MDR-1基因转录翻译P-gp,P-gp表达降低外排能力减弱,细胞外排化疗药物减少,从而减少其对化疗药物耐药性。本研究采用RT-PCR测量MDR-1RNA表达及MTT测定耐药性,RT-PCR[15]检测法特异性强,敏感度高,可避免同位素污染,可从基因、蛋白水平反映LC细胞耐药本质 ......
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