1.2细胞培养

    采用含10%灭活FBS、100 U/ml青霉素、100 μg/ml链霉素的DMEM培养基，并严格要求在37℃、CO2体积分数为5%的饱和湿度环境下进行细胞培养。当MDA-MB-231细胞生长呈70%～80%融合状态时，再以0.25%胰蛋白酶进行消化传代。以上细胞生长情况均在倒置显微镜下观察，取对数生长期的细胞进行实验。

    1.3实验分组

    实验分为溶剂对照组和药物干预组。比卡鲁胺先由DMSO溶解并配成100 mmol/L 储存液，-20℃避光保存。再以DMEM培养基将比卡鲁胺储存液稀释到所需的浓度，使其中DMSO终浓度<0.1%。溶剂对照组即终浓度0.1%的DMSO，药物干预组即比卡鲁胺终浓度分别为25、50、100 μmol/L。

    1.4细胞增殖抑制率的检测

    于96孔板中接种处于对数生长期的MDA-MB-231细胞，调细胞为4×103孵育12 h后加入不同浓度比卡鲁胺(0、25、50、100 μmol/L)，每组6个复孔。分别于0、24、48、72 h采用MTT法，按照说明书操作检测细胞活力，于酶标仪上测定各孔570 nm处吸光度(OD)值 ......