环状定点诱变技术在载体构建中的应用(2)
1材料与方法1.1供试品
pUC57-7NB2AA质粒(金斯瑞生物科技有限公司;订单编号:C8100EI120);pET26b-7NB2AA(华兰生物自我构建保存原核表达质粒)。
1.2材料
B528413型DH5α大肠感受态和A505255型琼脂粉(生工生物工程股份有限公司);LP0042型蛋白胨(赛默飞世尔科技公司);212750型酵母粉(Becton Dickinson公司);1161B型NdeI、1010B型BamHI、1160B型NcoI、1094A型Xho I和1235A型DpnI内切酶(宝日医生物技术有限公司);AP211型EasyPfu DNA Polymerase(北京全式金生物技术有限公司);K0502型Gene JET Plasmid Miniprep Kit(赛默飞世尔科技公司)。
1.3仪器设备
HYG-A型全恒温摇瓶柜(太仓实验设备厂);1-15PK型台式离心机(赛多利斯公司);SW-CJ-2FD型洁净工作台(苏州安泰空气技术有限公司);S100型PCR反应扩增仪(BIO-RAD公司);WD-9403C型紫外仪、DYY-10C型电泳仪和DYCP-31DN型电泳槽(北京六一生物科技有限公司);Alpha Imager HP型凝胶成像系统(Protein Simple公司);Nano Drop ONE型微量分光光度计(赛默飞世尔科技公司) ......
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