孙小艳 于 波 林黎娟

    1.辽宁省丹东市第一医院消化内科，辽宁丹东 118000；2.辽东学院分子实验室，辽宁丹东 118000

    我国是全球胃癌发病率和死亡率最高的国家之一。近年来胃癌的发病率居高不下，并逐年呈年轻化趋势发展[1]。胃癌早期手术效果较好，但大部分胃癌患者就诊时已经是肿瘤的中晚期，失去了手术时机。生物免疫疗法是继手术、放疗、化疗后的第四种疗法，可以增强机体抗肿瘤的免疫杀伤能力[2]。树突状细胞是目前发现的功能最强的抗原呈递细胞，其可以加工处理抗原，并以抗原肽MHC1类分子复合物的形式，将抗原信息提呈给T细胞，有效激活初始T细胞，高效介导特异性抗原的免疫应答。树突状细胞能将肿瘤抗原提呈给各种效应细胞，并促进其增殖，此作用是其他免疫细胞如巨噬细胞或B细胞的数百倍[3-4]。目前，针对黑色素瘤、甲状腺癌、乳腺癌、肾癌、卵巢癌等恶性肿瘤的临床实验显示，树突状细胞在治疗恶性肿瘤上具有一定效果[5-8]。在肿瘤治疗中已显示出广阔的应用前景[9]。但是目前树突状细胞的生物免疫治疗在肿瘤的治疗中只能发挥其辅助作用，原因一方面为树突状细胞具有异质性，体内数量甚微，外周血淋巴细胞中的树突状细胞比例不足1%[10]；另一方面为免疫源性较低的问题，难以完成对抗原的有效提呈，影响其杀伤肿瘤的效果。中医学认为“肾藏精，精生髓”，树突状细胞起源于骨髓造干细胞，具有自我复制与多向分化的潜能，补肾中药六味地黄丸，临床主要用于肝肾阴虚等症，研究证实六味地黄丸主要通过增强机体免疫防御系统功能来达到治病强身之功效[11]。前期实验证实，补肾药物具有类似细胞因子的作用[12]，可以提高树突状细胞的数量，本课题采用六味地黄丸诱导树突状细胞分化，增加其数量，以解决体内树突状细胞数量不足及免疫原性差的免疫治疗瓶颈。

    1 材料与方法

    1.1 实验细胞及动物

    1.1.1 实验细胞 胃癌细胞系MGC-803，由军事医学科学院提供。

    1.1.2 实验动物 SD大鼠[用于制备树突状细胞、四甲基偶氮唑盐(MTT)实验、平板克隆实验]购于中国军事医学科学院，合格证号：SCXK(军)-2017-008，雄性，四周龄，体重200～210g，清洁级(clean animals，CL)，饲养于通风、清洁、温暖(20～25℃)环境中，特供饲料喂养。NOD/SCID小鼠(用于荷瘤实验)购于军事医学科学院，合格证号：SCXK(军)-2017-105 ......