吴 楠 刘 侃 王晓梅

    1.深圳市南山区疾病预防控制中心疾病预防科，广东深圳 518054；2.深圳大学医学部肿瘤研究所，广东深圳 518000

    肝癌是全球高发的肿瘤之一，恶性程度高，预后生存期短，致死率高[1]。抑癌基因失活是肝癌发生发展机制中重要的遗传学基础[2]。2008年科学家应用特异性高的RNAi 筛选方法[3]，得到了12个新的抑癌基因，XPO4 就是其中一种。XPO4是细胞核转运因子家族成员，可调节Smad3[转化生长因子-β(TGF-β)信号传导中的组分]和Eif5a(两个密切相关的翻译起始因子)[4-6]。XPO4 在细胞中的去除会引起细胞癌变的概率增加[7-8]。有研究表明，肝癌中XPO4 的表达降低与肿瘤大小及病理分级相关，XPO4 的缺失提示预后差，且可以作为一个独立的危险因子[9-10]，目前利用XPO4基因开展肿瘤治疗研究的报道较少。本研究构建表达XPO4基因的载体，研究XPO4基因对肿瘤细胞的抑制作用，现报道如下。

    1 材料与方法

    1.1 材料

    真核表达质粒pcDNA3.1 购自Invitrogen公司；携XPO4基因质粒pCR4-TOPO-XPO4 购自Invitrogen公司；人肝癌细胞株SK-Hep1(XPO4基因完全缺失)由香港中文大学胡宝光博士惠赠；大肠埃希菌菌株DH5a 由深圳大学医学部肿瘤研究所保存。

    1.2 方法

    1.2.1 pcDNA3.1-XPO4 载体的构建 XPO4基因上游引物：5′-GGGGGTACCATGGTCAATAATGAACAA-3′；下游引物：5′-GGGGATATCTTATTTTACACAAAGGAG-3′ ......