曹 波 付 刚 王晓敏 柴春香 张兆光 陈学勋

    1.潍坊医学院附属医院急诊科，山东潍坊 261041；2.山东省潍坊市益都中心医院泌尿外科，山东青州 262500；3.山东省潍坊市益都中心医院病理科，山东青州 262500；4.潍坊医学院附属医院超声科，山东潍坊 261041；5.潍坊医学院附属医院肾内科，山东潍坊 261041

    肾细胞癌(RCC)是成年人肾脏恶性肿瘤的最常见类型，起源于近曲小管，所占比例约90%[1-2]。手术治疗是首选治疗方法，RCC的5年存活率可达到65%～90%[1]。当癌细胞转移，或者因其他疾病失去手术机会时，存活率大大降低，因此积极探索晚期RCC 有效治疗药物成为研究热点。PI3K/AKT/MTOR信号通路的激活在肾癌细胞的增殖、迁移、侵袭中起到重要的作用[3-8]。雷公藤甲素是雷公藤植物的有效成分提取物，可通过诱导肿瘤细胞的凋亡、干扰肿瘤细胞周期、抑制肿瘤血管生成，从而达到抗肿瘤的效果[9-10]。近几年研究发现，雷公藤甲素可通过PI3K/AKT/MTOR信号通路抑制卵巢癌细胞和胃癌细胞的增殖及侵袭[11-13]，而在肾细胞癌中的作用鲜有报道。本研究探讨雷公藤甲素通过PI3K/AKT/MTOR信号通路对肾癌A498细胞增殖、迁移和侵袭的影响，旨在为进一步研究提供依据。

    1 材料与方法

    1.1 材料

    肾癌A498细胞(ATCC 细胞库)；雷公藤甲素(美国sigma 公司)；β-actin、AKT、p-AKT、MTOR、p-MTOR单克隆抗体(福州迈新生物技术公司)；MTT 试剂盒(北京普洛麦格生物技术公司)；蛋白提取试剂盒、BCA蛋白浓度检测试剂盒、5×SDS 蛋白上样缓冲液、二甲基亚砜及牛血清白蛋白(广州碧云天生物技术研究所)；ECL 试剂盒(北京普利莱基因技术有限公司)；Transwell 小室(美国Corning 公司)。

    1.2 方法

    1.2.1 细胞系和培养环境 A498细胞在含10%FBS的RPMI-1640 培养基中培养 ......