陈悦悦 刘 勇 陈银楠 李 巍▲

    1.扬州大学医学院转化医学研究院，江苏扬州 225009；2.大连理工大学生命科学与药学学院，辽宁盘锦 124221

    苯妥英是治疗癫痫持续性发作的重要二线药物[1-2]。其代谢清除主要由人肝微粒体细胞色素P450(cytochrome P450，CYPs)超家族的CYP2C9 和CYP2C19负责，其中CYP2C9 贡献率达90%[3]。苯妥英治疗窗窄，血药浓度易受同服药物影响[3]，尤其在恶性肿瘤合并癫痫的患者中，同服多种药物存在基于对肝微粒体CYPs 抑制而导致苯妥英血药浓度提高，进而引起不良反应发生的风险[4]。鸦胆子油软胶囊和鸦胆子油乳注射液是已上市的应用于肿瘤辅助治疗的中成药[5-6]，其抗肿瘤的主要活性成分是鸦胆子苦醇和鸦胆子素D[7-8]。此外，水飞蓟是国内外多种护肝保健品中的主要活性成分，也是用于治疗抗肿瘤药物导致肝损伤的重要药物之一[9-10]。水飞蓟宾A 和水飞蓟宾B 是其发挥抗氧化、抗纤维化和肝脏保护等作用的重要物质基础[11]。鸦胆子和水飞蓟制剂与苯妥英在癫痫合并肿瘤患者中均存在联合使用的可能，但上述活性成分对人肝微粒体CYPs 催化苯妥英代谢的影响尚无相关报道。本研究使用人肝微粒体体外孵育体系，探讨鸦胆子苦醇、鸦胆子素D、水飞蓟宾A 和水飞蓟宾B 对CYPs 催化苯妥英代谢的抑制作用，并为以服用中药为辅助药物治疗的临床恶性肿瘤合并癫痫患者提供参考依据，以避免临床中药-西药相互作用导致的不良反应的发生。

    1 材料与方法

    1.1 材料与仪器

    QTRAP 6500+三重四级杆液相质谱联用仪(美国AB SCIEX 公司)：配有电喷雾离子化源(ESI)和Analyst 1.4.2 数据处理软件；ExionLCTM 超高效液相色谱仪(美国AB SCIEX 公司)：配置四元梯度泵、在线脱气机、自动进样器、柱温箱；VORTEX-2 涡旋振荡器(美国Scientific Industries 公司)；AUY120 电子天平(岛津国际贸易有限公司)；SY-1220 恒温水浴槽(金坛市杰瑞尔电器有限公司)；ThermoStat C 恒温孵育器(美国eppendorf 公司)。

    人肝微粒体(批号：201801SUBK)购自上海瑞德肝脏疾病研究有限公司；氯化镁(批号：20150202)购自国药集团化学试剂有限公司；苯妥英(批号：C1512060)、甲酸(批号：H2014333)购自阿拉丁公司；伞形酮(批号：BCCC1923)和5-(4 羟基苯基)-5-苯基乙内酰脲(p-HPPH)(批号：0021309)购自美国Sigma公司；1-氨基苯并三唑(批号：41043)购自Medchem Express 公司；乙腈(批号：20230531)和甲醇(批号：20230331)购自德国Merck 公司；水飞蓟宾A(批号：K1610034)、水飞蓟宾B(批号：CFS201902)购自武汉中标科技有限公司；鸦胆子苦醇(批号：P12J10F79833)、鸦胆子素D(批号：Y08M631)和还原型辅酶Ⅱ(NADPH ......