陈 涛 刘 聪 万思哲 朱 萱▲

    1.江西省抚州市第一人民医院消化内科，江西抚州 344099；2.南昌大学第一附属医院消化内科，江西南昌 330006

    肝纤维化是各种病因(如病毒、血吸虫、酒精、非酒精性脂肪性肝炎、胆汁淤积、自身免疫性肝病等)引起肝损伤后细胞外基质(extracellular matrix，ECM)弥漫性过度沉积与瘢痕形成的病理过程，是肝脏对慢性损伤的病理修复反应[1-2]。肝纤维化的持续发展最终可导致肝硬化甚至肝癌，严重危害人类健康[3-4]。Marcellin 等[5-6]研究发现，早期对肝纤维化进行药物干预可逆转肝纤维化，从而降低死亡率。 在肝纤维化的发生和发展过程中，Ang Ⅱ被认为是重要的促纤维化因子之一，Sahara 等[7]研究发现Ang Ⅱ可以通过作用于 AT1R，诱导I 型胶原的合成，从而促进肝纤维化的发生发展。

    中药单体熊果酸(ursolic acid，UA)是一种五环三萜羧基酸类化合物，具有保护肝脏功能、抗菌、抗癌、抗氧化和抗炎等药理活性[8-11]。 本课题组前期研究成果表明，UA 可能通过抑制NOX4/ROS 和RhoA/ROCK1信号通路，减少C57BL/6 野生型小鼠的肝脏内胶原沉积[12]。因此，本研究将进一步探讨UA 减少肝脏内胶原沉积是否与其抑制肝脏Ang Ⅱ/AT1R 信号通路有关，阐明UA 的抗肝纤维化分子机制，为其应用于肝纤维化治疗提供实验和理论依据。

    1 材料与方法

    1.1 材料

    1.1.1 主要试剂 UA(Sigma-Aldrich 公司)；培哚普利(MedChemExpress 公司)；血清谷草转氨酶(aspartate aminotransferase，AST)、谷丙转氨酶(alanine aminotransferase，ALT)、总胆红素(total bilirubin，TBil)检测试剂盒(武汉伊莱瑞特生物科技有限公司)；BCA 蛋白浓度测定试剂盒(碧云天生物科技公司)；天狼星红染色试剂盒(北京索莱宝科技有限公司)；4%的多聚甲醛固定液(北京索莱宝科技有限公司)；mRNA 引物(生工生物工程上海股份有限公司)；总RNA 提取试剂盒、cDNA 第一链合成试剂盒、荧光定量PCR 试剂盒(北京天根生化科技公司)；兔抗鼠Ang Ⅱ多克隆抗体(英国Abcam 公司)；兔抗鼠AT1R 多克隆抗体(英国Abcam 公司)、兔抗鼠Ⅰ型胶原蛋白(Collagen-Ⅰ)多克隆抗体(英国Abcam 公司)、兔抗鼠α-平滑肌肌动蛋白(α-smooth muscle actin ......