正交实验优选桑籽中1-脱氧野尻霉素的提取工艺
脱脂,供试,盐酸,1仪器,试剂与材料,2试剂与材料,2方法与结果,1供试品制备,2DNJ标准品的配制,3DNJ的测定方法,4统计学方法,5DNJ提取的单因素实验考察及结果,6DNJ提取的正交实验结果,7提取工艺条件
吕志强 李 乔 闫海龙 徐 文 赵振寰 巩丽丽 田景振▲1.青岛大学附属医院药学部,山东青岛 266000;2. 青岛酒店管理职业技术学院总务处门诊部,山东青岛 266000;3.青岛妇女儿童医院康复科,山东青岛 266000;4.山东中医药大学药学院,山东济南 250355
桑籽为桑科植物桑(Morus aLba L.)的成熟果实的种子,桑树果实含籽量为2.8%。桑籽中含大量的脂类、氨基酸及丰富的微量元素及类黄酮物质,具有降血糖、调血压、调节植物神经等功效。桑葚加工后的残渣中大部分为桑籽,除了作为饲料外,其在食品、医疗工业方面仍存在极大开发利用空间。目前已有学者对桑类药材降血糖活性成分及其作用机理进行深入研究,发现其降血糖活性成分为多羟基生物碱[1],其中以1-脱氧野尻(1-deoxynojirimycin,DNJ)为代表的多羟基生物碱是其重要的成分[2],能够抑制α-葡萄糖苷酶活性[3-4],较好地调节血糖代谢指标[5-6],对于肝糖代谢的改善[7]、胰岛素抵抗的降低[8],都具有明显的作用。但是相关文献对DNJ 的提取工艺如何最优化却鲜有报道,本实验采用盐酸乙醇作为提取剂,应用正交实验法比较不同提取条件对DNJ 提取率的影响,优选出了最佳提取工艺,拓展了桑资源研究的领域,为研发新药和保健食品提供了依据,并为相关课题的研究奠定基础。
1 仪器、试剂与材料
1.1 仪器
XP205 型十万分之一电子分析天平[瑞士梅特勒-托利多国际贸易(上海)有限公司];L-2000 高效液相色谱系统(日本株式会社日立制作所);L-2400 型紫外检测器(日本株式会社日立制作所);Diamonsil C18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5 μm,中国北京迪科马科技有限公司);RE52-99 旋转蒸发仪(中国上海亚荣生化仪器厂);HWS24 双列四孔型仪表恒温水浴锅 (中国上海树立仪器仪表有限公司);BS110S 型电子分析天平[德国赛多利斯科学仪器(北京)有限公司]。
1.2 试剂与材料
桑籽(来源于山东省蚕业研究所,经山东中医药大学教授周凤琴鉴定为桑科植物桑Morus aLba L.的成熟果实的种子[9]),样品分装后4℃贮存;DNJ 标准品(上海顺勃生物工程技术有限公司,纯度98%以上,生产批号:201103018);乙腈(色谱纯,天津科密欧化学试剂有限公司,生产批号:20121013); 芴甲氧酰氯(Fmoc-Cl)(分析纯,上海晶纯生化科技股份有限公司 ......
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