硫辛酸对高糖诱导的肾小球系膜细胞NLRP3炎症小体表达的影响
1对象与方法,1主要仪器与试剂,2实验分组及方法,3统计学方法,2结果,1不同浓度LA对人HMC细胞存活率的影响,2流式细胞术检测ROS的表达水平,3RT-PCR检测NLRP3mRNA的表达水平,4
冯 颖 赵淑敏 王中英 刘 艳1.菏泽医学专科学校内科教研室,山东菏泽 274000;2.菏泽医学专科学校附属医院内分泌科,山东菏泽 274000
糖尿病(diabetic mellitus,DM)是最常见的代谢性疾病之一,严重影响人类身心健康,国际糖尿病联盟2019年的资料显示,在世界范围内DM 患病人数已达10 亿人,预计该数字将在2030年增加25%,在2045年增加51%[1]。 糖尿病肾病(diabetic nephropathy,DN)是DM 患者最常见的慢性并发症之一。一项对400 名2型糖尿病患者的研究发现,将近一半的患者有微量白蛋白尿[2],是DM 患者死亡的主要原因之一。
近年来有研究显示,氧化应激与DM 及其并发症的发生发展密切相关[3]。 DN 患者应用硫辛酸(lipoic acid,LA) 可以降低血清中炎症细胞因子的水平并改善肾脏功能[4]。 DN 患者应用LA 是否影响NLRP3 炎症小体表达,目前鲜有报道,本研究拟观察高血糖对培养的人肾小球系膜细胞(human glomerular mesangial cells,HMC)中NLRP3 炎症小体表达的影响,并通过观察LA 对高糖诱导的HMC 中NLRP3 炎症小体表达的影响,探讨LA 对肾脏保护作用及可能作用机制,以期探寻DN 发病的新机制和防治新策略。
1 对象与方法
1.1 主要仪器与试剂
人HMC 购自美国ATCC 公司;10%胎牛血清的DMEM 培养液、青霉素-链霉素双抗、胎牛血清及胰酶购自美国HyClone;LA 购自美国Sigma 公司; 细胞计数试剂盒-8 购自同仁化学研究所;Real Time PCR 试剂盒购自Invitrogen(Carlsbad,CA,USA);分光光度计购自Thermo Fisher Scientific(Waltham,MA,USA);NLRP3 抗体购自北京中杉。 蛋白上样缓冲液、PBS 粉剂脱脂奶粉、BCA 蛋白浓度测定试剂盒购自江苏碧云天生物试剂公司 ......
您现在查看是摘要页,全文长 7998 字符。