党济政 易 莉

    1.重庆医科大学附属大学城医院药学部，重庆 401331；2.重庆市万州中心血站检验科，重庆 404000

    糖作为三大营养物质之一在人体中承担着非常重要的角色，而很多糖苷类化合物具有特殊的生物活性，如抗菌性、抗病毒和抗肿瘤活性[1]。β-半乳糖苷酶是指一类水解含半乳糖苷键物质的酶类，现今该酶在生物技术领域如基因工程、酶工程、蛋白质工程等方面也都发挥着重要作用，并开始广泛应用于医药等领域。β-半乳糖苷类化合物是β-半乳糖苷酶水解的底物，通过该酶-底物水解反应过程可测定酶活性，并可将其广泛用于筛选酶抑制剂类药物、测定血清酶及免疫分析标记酶、监测特殊毒害性酶抑制剂等[2]。

    4-硝基萘酚、4-硝基苯酚等化合物因在410 nm左右有较强的紫外吸收经常被选择作为显色团。本文初步选择4-硝基-1-萘基-β-D-半乳糖苷作为β-半乳糖苷酶的显色底物，该底物用于β-半乳糖苷酶活性测定等有着广泛的应用前景，因而4-硝基-1-萘基-β-D-半乳糖苷的合成也具有重要的意义[3]。

    糖苷类化合物中含有较多羟基和缩醛结构，一般合成过程都较为复杂，且产物中存在α 与β 异构体，而如何高效地得到单一构型的产物一直是糖苷合成中的重点，现常用的糖苷合成方法如磷酸酯糖供体法、三氯乙酰亚胺酯法等操作过程较复杂，对实验设备要求高且得到的产物选择性不高。本文路线设计先将所有羟基酰化保护即以D-半乳糖为起始原料与乙酸钠反应，通过高温回流乙酰化得到高度选择性β-D-半乳糖五乙酸酯。β-D-半乳糖五乙酸酯经过溴化氢溴代、4-硝基-1-萘酚取代、甲醇钠去乙酰化最后重结晶得到目标化合物4-硝基-1-萘基-β-D-半乳糖苷，合成路线见图1，与常用的方法相比，本研究的合成方法反应条件温和，操作简便可行且产物选择性高，是具有应用价值潜力的合成方法路线。因此该研究为β-半乳糖苷酶-底物水解反应测定酶活性及之后的应用奠定了重要基础。

    图1 4-硝基-1-萘基-β-D-半乳糖苷的合成路线

    1 仪器与试剂

    1.1 仪器

    BS210S 型电子天平(德国赛多利斯公司)；恒奥德HWC-RDY-1B 熔点仪(北京恒奥德仪器仪表有限公司)；Bruker-AV-500 型核磁共振仪(瑞士Bruker 公司)；MicrOTOF QII 高分辨质谱(德国Bruker 公司)；旋转蒸发器RE-52(上海青浦泸西仪器厂)；85-2型恒温磁力搅拌器(上海司乐仪器厂)；电热恒温水浴锅(郑州长城科工贸有限公司)；SHZ-D(Ⅲ)循环水真空泵(河南巩义市英峪予华仪器厂)；超纯水生成仪(美国Elix MILLIPOER) ......