冯春燕 唐宋文 黄秀榕▲ 祁明信 胡艳红

    1.福建中医药大学附属第二人民医院眼科，福建福州 350003；2.福建中医药大学，福建福州 350003

    研究发现雌激素对晶状体有保护作用，可减轻晶状体氧化损伤、抑制晶状体上皮细胞(lens epithelial cell，LEC)凋亡，起到防治白内障的作用[1-6]。 富含植物雌激素的中药，如补骨脂、牛膝、葛根等具有雌激素样活性[7]，在抗癌、预防心脑血管疾病等方面，具有雌激素不可替代的很多优点。金雀异黄素(genistein，GEN)又名染料木黄酮，是一种来源于豆类植物的异黄酮类化合物，其化学名为5，4，7-三羟基异黄酮。 它是有芳香环的三苯基异黄酮化合物，带有两个酚羟基的结构类似于雌二醇(β-estradiol，E2)，分子量为270，能低亲合力地结合雌激素受体(estrogen receptor，ER)，具有微弱雌激素样作用，其生物效应相当于E2的10-5～10-3，故有植物雌激素之称[8]。

    课题组前期工作发现GEN 能够保护实验性人晶状体上皮细胞系(human lens epithelial cell B3，HLEB3)氧化损伤和减轻细胞凋亡程度[9-11]。本研究拟在探讨具有雌激素活性的中药单体GEN 防护HLE-B3 氧化损伤的基础上，采用表面增强激光解析离子化飞行时间质谱(surface-enhanced laser desorption ionization time of flight mass spectrometry，SELDI-TOF-MS)联合蛋白质芯片技术检测分析GEN 作用于氧化损伤的HLE-B3 后线粒体蛋白质表达谱的改变，寻求其防护HLE-B3 氧化损伤的线粒体蛋白质组学规律及作用靶点，为临床寻求防治老年性白内障的安全有效天然药物提供科学的实验依据。

    1 材料与方法

    1.1 材料

    HLE-B3 细胞由广州中山大学眼科研究中心提供；E2粉末(Sigma，美国，纯度97%)，GEN 粉末(国家药品生物制品检定所，中国，纯度96.3%)，30%过氧化氢(hydrogen peroxide，H2O2，上海试剂总厂，中国)，DMEM 培养基(DMEM，GIBCO，美国)，线粒体分离试剂盒(试剂A 和试剂C ......