陈 雪 张嫄怡 段文彪

    1.肇庆医学高等专科学校病理学教研室，广东肇庆 526020；2. 肇庆医学高等专科学校学校办公室，广东肇庆 526020

    脑缺血再灌注损伤是脑组织出现供血中断后再恢复血流灌注时出现的病理损伤过程，其发生机制复杂，主要与钙超载、氧化应激、能量衰竭、炎症凋亡等有关[1]。 脑缺血再灌注损伤，破坏血脑屏障，引起大量炎症因子释放，损伤神经元，继而造成脑功能障碍[2]。炎症小体通路激活后，细胞会进行程序性死亡，细胞焦亡在脑缺血再灌注损伤的神经元损伤中越来越受重视。 二苯乙烯苷(tetrahydroxy stilbene glucoside，TSG)是中药何首乌中主要的水溶性生物活性成分，具有降血脂、抗炎、抗氧化、抗动脉血管硬化、抗衰老和神经保护等作用。 目前对TSG 在脑缺血再灌注损伤动物模型中的研究主要是通过清除自由基、 抗氧化、抑制细胞钙超载等来保护脑神经元细胞，影响神经细胞凋亡，发挥神经保护作用。 本研究通过建立脑缺血再灌注损伤动物模型， 探索TSG 对受损的海马组织Nalp3、Caspase-1 及IL-18 表达的影响， 探究TSG 抗炎症反应的脑保护作用机制。

    1 材料与方法

    1.1 仪器与试剂

    mRNA 提取试剂盒和DNA Marker(天根生化科技有限公司)，逆转录试剂盒和PCR 反应体系(莫纳生物科技有限公司)，引物(武汉金开瑞生物工程有限公司)，TSG(上海士锋生物科技有限公司，批号：178031025)，PCR 扩增仪(上海力康生物医疗科技有限公司，T960A)，琼脂糖水平电泳槽(北京六一生物科技有限公司，DYCP-31DN)，凝胶成像系统(上海天能科技有限公司，Tanon4100)。 实验所需的仪器由肇庆医学高等专科学校科研平台提供。

    1.2 实验分组及模型的制备

    健康雄性SD 大鼠，SPF 级，2月龄，体重(200±10)g，购买于广东省医学实验动物中心[许可证号SCXK(粤)2013-0001]，饲养环境温度22～25℃，湿度约55%，明暗交替时间为12 h/12 h，自由摄食，适应性饲养一周。 大鼠随机分为5 组，即假手术组、模型组、TSG 低剂量组、TSG 中剂量组、TSG 高剂量组，每组12 只。 大鼠术前禁食12 h，不禁水。

    采用夹闭双侧颈总动脉制备脑缺血再灌注损伤模型。 用10%水合氯醛(300 mg/kg)腹腔注射麻醉大鼠后，仰卧固定，备皮，手术区域常规消毒后沿颈部正中线作一纵形切开 ......