高效液相色谱法测定血浆中替考拉宁的血药浓度
内标,血样,乙腈,1材料与仪器,1试药,2仪器,2方法与结果,1HPLC色谱条件,2溶液的配制方法,3方法学考察,4样品测定,3讨论,1色谱条件的选择,2内标的选择,3血浆样品前处理溶剂的选择
王 钦 姚 燕1.南通大学附属医院药学部,江苏南通 226001;2.上药控股南通有限公司,江苏南通 226001
替考拉宁临床可用于耐甲氧西林金黄色葡萄球菌和肠球菌感染的治疗,适应证主要是脓毒症、脓毒性关节炎、嗜中性粒细胞减少、脓毒性心内膜炎、骨髓炎急性发作等,且已知的不良反应发生率低。替考拉宁口服无效,与万古霉素比较,其半衰期明显延长至80~168 h,在体内约97%以原型经肾排泄,其余经肝脏代谢。现有的替考拉宁血药浓度检测方法主要有:高效液相色谱法(high performance liquid chromatography,HPLC)、液相色谱-串联质谱联用法、微生物检定法、荧光偏振免疫法、胶束电动毛细管色谱法等,其中,HPLC 法具有操作简单、灵敏度高、专属性好、成本较低廉等优势。治疗非严重细菌感染替考拉宁的稳态血药谷浓度需达到10~25 μg/ml,方可达到治疗效果,而治疗严重细菌感染则需达到15~30 μg/ml。此外,替考拉宁需在开始给药时给予足够的负荷剂量,再给予维持剂量,这样可迅速达到较稳定的血药谷浓度。因此,在临床实践中应合理监测其血药浓度以保证疗效。本研究采用内标法优化HPLC 法检测血浆中替考拉宁的血药浓度,旨在为临床制定更合理的给药方案提供借鉴。
1 材料与仪器
1.1 试药
替考拉宁对照品(效价:894 U/mg,中国食品药品检定研究院,批号:130374-201002);哌拉西林钠对照品(纯度:98.0%,上海梯希爱化成工业发展有限公司,批号:5C8OB-CA);注射用替考拉宁[赛诺菲(北京)制药有限公司,批号:CF20178,规格:0.2 g/支];乙腈、甲醇(色谱纯,德国Merck 公司);二氯甲烷、磷酸、磷酸二氢钾均为分析纯(国药集团化学试剂有限公司);实验用水为Millipore 超纯水。
1.2 仪器
1100 型高效液相色谱仪(美国Agilent 公司)(包括自动进样器、真空脱气机、四元泵、紫外检测器、色谱工作站);Diamonsil C色谱柱(美国Agilent 公司 ......
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