钟艳春 叶勇军 刘午阳

    赣南医学院第一附属医院骨科，江西赣州 341000

    有限的使用寿命是人工关节置换手术最大的缺陷，产生这一缺陷的主要原因是术后出现的关节假体无菌性松动。目前，对于人工关节无菌性松动，非手术治疗疗效差，最终均需行翻修手术，而翻修手术费用昂贵，创伤大，术后并发症多，给患者带来巨大痛苦。因此，探索出更安全有效的人工关节无菌性松动防治方法意义重大。钙敏感受体(calcium-sensing receptor，CaSR)是一种细胞表面受体，属于G 蛋白偶联受体家族。研究发现，CaSR 参与了多种骨关节炎症疾病的发生、发展过程，如骨关节炎、类风湿性关节炎等，通过抑制CaSR 可以有效减轻炎症反应。 同时，CaSR 还在单核细胞、破骨细胞等多种细胞的成熟、分化及凋亡中起重要调控作用。 磨损颗粒诱导的骨溶解也是一种炎症性骨溶解过程，而通过抑制CaSR 是否可以减轻磨损颗粒诱导的炎症反应及骨溶解，目前尚不清楚。本实验通过建立人工关节无菌性松动小鼠颅骨模型，给予不同浓度CaSR 抑制剂(NPS2390)干预后，观察其对磨损颗粒诱导骨溶解及炎症因子表达的影响，为人工关节无菌性松动的防治提供新思路。

    1 对象与方法

    1.1 实验动物

    40 只8～10 周龄C57BL/6J 雄性小鼠，体重19～22 g，购于上海斯莱克动物实验有限责任公司，许可证号码：SCXK(沪)2017-0005，饲养于SPF 实验动物房内。 动物实验通过赣南医学院第一附属医院动物实验伦理委员会审核通过，实验过程符合医学伦理规范(伦理审批号：ABRLLSC2021-0112)。

    1.2 主要仪器及试剂

    磨损颗粒：取人工髋关节翻修术取出的金属关节假体柄，参照前期研究文献制备(激光粒度仪分析显示： 颗粒平均粒径2.93 μm，98%颗粒粒径<6.67 μm，主要成分为钛、铜、铬)。 CaSR 抑制剂NPS2390(美国Sigma 公司，226878-01-09)； 小鼠白细胞介素-1β(in terleukin-1β，IL-1β)ELISA 检测试剂盒(上海江莱生物科技有限公司，JL18442)；小鼠肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factor-α，TNF-α)ELISA 检测试剂盒 (上海江莱生物科技有限公司，JL10484)；抗酒石酸酸性染色液(solarbio 公司，G1942)；Micro-CT(SCANCO MEDICAL，瑞士，vivaCT40)；图像分析软件(Image-Pro Plus 6.0) ......