5-氮-2＇脱氧胞苷对急性粒细胞性白血病细胞系HL-60中CDH13基因甲基化的影响
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作者单位：430040 武汉市东西湖区妇幼保健院(陶钧宇)；武汉市儿童医院(王艳丽)
通讯作者：陶钧宇
【摘要】 目的 分析探讨5-氮-2'脱氧胞苷对急性粒细胞性白血病细胞系HL-60中CDH13基因甲基化的影响。方法 5-Aza- dC处理培养的HL-60细胞，用甲基化特异性PCR(MSP) 法检测处理前后细胞中CDH13基因的甲基化状态，RT-PCR法检测用药前后细胞中CDH13 mRNA表达的变化。结果 HL-60中CDH13启动子区发现甲基化，应用5-Aza-dC能使CDH13基因启动子区CpG岛去甲基化，而且经药物处理后CDH13 mRNA的表达较前明显增强。结论 5-Aza-dC能逆转CDH13基因甲基化状态，从而调控CDH13基因表达。
【关键词】 5-氮-2'脱氧胞苷； CDH13； HL-60
急性粒细胞性白血病是小儿最常见的恶性肿瘤，其发病与基因的转位、突变以及部分基因结构的改变密切相关[1]。甲基化导致抑癌机制失活，影响急性粒细胞性白血病的发生、发展和复发。CDH13是一种抑癌基因，在急性粒细胞性白血病中它的表达下调[2]。5-氮-2'-脱氧胞苷(5-Aza-dC) 是目前常用的一种甲基化抑制剂，能抑制抑癌基因的甲基化从而调节细胞的分化和基因表达。本研究应用5-Aza-dC干预培养的人急性粒细胞性白血病细胞系HL-60，观察干预前后CDH13基因启动子区甲基化状态及表达水平，为急性粒细胞性白血病的药物治疗提供理论依据。
1 材料与方法
1.1 材料 人急性粒细胞性白血病细胞系HL-60，5-Aza-CdR为美国Sigma公司产品，RNA提取试剂Transzol购自全式金公司，逆转录试剂盒购自美国Fermentas公司，甲基化修饰的试剂盒购于ZYMO RESEARCH公司 ......
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