决明子\枸杞果\绿茶对非酒精性脂肪肝小鼠血脂代谢的影响对比(2)
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1 材料和方法
1.1 实验动物 KM小鼠，清洁级，小鼠平均体重为21.3 g，波动范围在1.4 g上下。
1.2 实验试剂 胆固醇(上海源聚生物科技有限公司生产，批号：080502)；胆酸(中国医药集团上海化学试剂公司，批号：20070120)；猪油、蛋黄粉、普通饲料、决明子、枸杞果、绿茶(市购)；生理盐水。
1.3 实验仪器 美国贝克曼CX5 PRO全自动生化分析仪，尼康YS100和尼康E200显微镜、加拿大PixeLINK显微摄像系统,上海良平仪器仪表公司JA3003电子天平,沈阳龙首电子仪器公司LS-2055AT的全自动石蜡切片机。
1.4 动物分组及处理 30日龄以上雌鼠250只，随机取其中125只，并把125只KM小鼠随机分为5组，空白对照组予以普通饲料，其余4组采用高脂饮食建立的非酒精性脂肪肝模型。给予高脂饲料饲(10%猪油，10%蛋黄粉，4%胆固醇，1%胆酸，75%普通饲料)，饲喂4周后每组解剖5只[5，6]，病理证实小鼠非酒精性脂肪肝模型已形成，予以灌喂治疗。甲、乙、丙三组为治疗组，丁组为模型对照组，戊组为空白对照组，甲组经灌喂予决明子浓缩液，乙组经灌喂给予枸杞果浓缩液，丙组经灌喂予绿茶浓缩液，丁、戊组同时予等量的生理盐水灌喂对照，每天早晚9点各灌喂一次；每次每只小鼠灌喂量为10 mg/kg，各组按原饲料进行饲养[7,8]。实验开始后每2周各组动物均取5只解剖，取肝作组织病理学观察，了解其病理变化情况，同时采集静脉血，分离血清，采用全自动生化分析仪，测定TC、TG、ALT、AST、HDL-C和LDL-C浓度，并取肝脏，制肝匀浆，测定LTG、LTC。
表1 KM小鼠分组及不同饮食喂养情况
1.5 观测指标及检测
1.5.1 一般项目 观察动物的体重、饮食、毛发、活动情况、肝/体重比等。
1.5.2 血脂检测 于动物处死前，采取各组动物血液分离血清，采用生化分析仪测定。
1.5.3 病理学观察 取肝左叶用10%中性福尔马林溶液固定，石蜡包埋切片，HE染色[9]，作肝组织病理学观察，光学显微镜下拍照记录，了解炎症改善情况和组织脂肪变性的程度。
1.6 统计学方法 采用SPSS 13.0统计软件进行统计分析 ......
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