靶向Twist基因逆转卵巢癌耐药细胞化疗敏感性的研究(2)
2.2 RNA干扰前后SKOV3/ADM细胞中Twist基因的转录水平 各组细胞在相对于262 bp处均见扩增条带,且在100 bp以上处可见内参β-actin的条带,各组间其亮度差异无统计学意义(P>0.05)。用Band Scan图像分析软件对结果进行分析,pTWIST-shRNA转染组与空载体转染组、非特异转染组和非转染组比较,差异均有统计学意义(P<0.01)。与非转染组比较,pTWIST-shRNA转染组细胞Twist mRNA的抑制率达45.5 %。2.3 pTWIST-shRNA 对细胞Twist蛋白质表达的影响 免疫细胞化学染色法显示,pTWIST-shRNA转染组细胞Twist蛋白表达明显低于非转染组、空载体转染组和非特异性转染组,差异有统计学意义(P<0.05),而空载体转染组、非特异性转染组与非转染组之间的表达差异无统计学意义(P>0.05)。
2.4 MTT检测各组细胞对阿霉素的半数抑制浓度 不同质粒转染入各组细胞,并暴露于阿霉素48 h后,各组细胞存活率均随阿霉素浓度的增加而降低,其中特异性转染组降低最为显著。非转染组SKOV3/ADM的IC50(16.54±0.23) μg/ml,其亲本细胞SKOV3为(6.04±0.11) μg/ml ......
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