作者单位：266409 山东省胶南市泊里镇中心卫生院(臧泉红)；潍坊医学院附属医院(陈昭日，张丽芹，戴淼，王春一，吕秀萍)

    通讯作者：戴淼

    【摘要】 目的 探讨载体表达的小干扰RNA(siRNA)影响卵巢癌耐药细胞株Twist基因的表达、促进凋亡并逆转其阿霉素耐药的可行性。方法 体外构建Twist小发卡状RNA(shRNA)的表达质粒，脂质体法介导将其转染入SKOV3/ADM细胞。采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测Twist mRNA的表达；使用免疫细胞化学法(ICC)检测Twist蛋白的表达；使用四甲基偶氮唑蓝法(MTT)测定各组细胞对阿霉素的半数抑制浓度(IC50)；流式细胞术检测其对卵巢癌细胞凋亡的影响。结果 Twist shRNA转染组细胞Twist mRNA 的表达与其他两组相比明显减弱，Twist蛋白表达明显下调，差异均有统计学意义(P<0.01)；阿霉素敏感性比正常对照组提高了约2.5倍；流式细胞仪显示阿霉素作用24 h后，特异性转染组细胞周期分布发生明显改变，G₀/G₁期细胞比例增多，而S期细胞比例减少，凋亡率显著升高，差异有统计学意义(P<0.05)。结论 针对TWIST合成的siRNA能够有效地抑制TWIST mRNA和蛋白的表达 ......