ER\PR和C-erbB-2在甲状腺癌中的表达及意义(2)
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【Key words】 Estrogen receptor; Progesterone receptor; C-erbB-2; Thyroid carcinoma; Immunohistochemistry
甲状腺癌是最常见的甲状腺恶性肿瘤,约占甲状腺原发性肿瘤的1/3,临床上较少见,但近年来呈上升趋势。其发病原因目前尚不清楚,除了一些公认的不确定因素,如可能与放射线和流行性甲状腺肿有关,某些髓样癌可有家族遗传性,部分未分化癌可能来自分化性乳头状腺癌和滤泡状腺癌等外,由于甲状腺癌发病性别差异较大,估计可能有性激素等因素的参与。甲状腺癌的发生、浸润转移机制尚不清楚,对甲状腺癌的生物学行为的研究也一直是人们关注的焦点。本研究通过检测ER、PR、C-erbB-2在甲状腺癌中的表达,探讨它们的临床意义,为探索甲状腺癌的发生发展的机制,判断分化程度、预后及有无淋巴结转移提供依据。
1 资料与方法
1.1 一般资料 选择潍坊医学院附属医院1995年~2005年手术切除并经病理证实的甲状腺癌存档标本53份,男10例,女43例,中位年龄40岁(20~75岁)。选择同期甲状腺腺瘤标本25份,另取腺瘤旁正常甲状腺组织25份。53例甲状腺癌患者术前均未做放、化疗,有完整临床资料。乳头状癌38例,滤泡状癌13例,未分化癌2例。
1.2 试验方法
1.2.1 所有组织均用10%甲醛液固定,常规石蜡包埋,4 μm厚连续切片,分别做HE和免疫组化染色
1.2.2 主要试剂 ER、PR、C-erbB-2基因、二步法染色试剂盒、DAB显色试剂盒、0.01 M PBS液、抗原修复液均购于北京中山生物技术有限公司。
1.2.3 采用二步法染色 根据试剂盒操作说明书中的要求和步骤制作标本,阳性对照采用对照片(购于北京中山试剂公司),以PBS代替一抗作阴性对照。
1.3 结果判定标准 根据着色深浅程度及阳性细胞数量(%),由两名经验丰富的病理科医师在400倍光镜下分别随机选择10个视野分析,并单独作出检验评估。阳性细胞必须是:(1)细胞结构清晰;(2)细胞定位性好;(3)着色明显高于背景。对表达强度进行半定量评估分级,即不着色为0分,浅黄色为1分,深黄色为2分,黄褐色为3分;计数阳性细胞百分率。将两者相乘,得免疫组化值H:H<0.5(-), 0.5≤H<1(+),1.5≤H(+++)。-~+视为阴性表达,++~+++视为阳性表达。
1.4 统计学处理 用SPSS 10.0统计软件进行统计学处理。采用χ2>/sup>检验和Fisher精确概率法进行统计学分析 ......
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