+细胞体外诱导分化为树突状细胞及其扩增> 人脐血CD34+细胞体外诱导分化为树突状细胞及其扩(2)
1.2.3 形态观察 培养过程中每天在倒置显微镜下观察细胞生长情况、形态变化并拍照。1.2.4 流式细胞仪检测树突状细胞CD83分子的表达 收集培养14 d的DC用冷Buffer(PH 7.2 PBS + 150 mM NaCl + 0.09% NaN3 + 0.2% BSA)悬浮为1×106>/sup>/ml,每管加入100 μl细胞悬液。每管加入20 μl FITC-CD83,对照管加20 μl FITC-IgG,4 ℃避光过夜。适量Buffer洗涤细胞。弃上清,加Buffer 1 ml,混匀。流式细胞仪 (FACS Calibur SE,美国BD公司)按说明上机检测。Winmdi 2.9软件分析结果。
1.3 统计学处理 应用SPSS 13.0统计软件进行分析,所有数据均以x±s表示,
2 结果
2.1 细胞形态 50 ml脐带血可分离出CD34+>/sup>细胞(1.1±0.2)×106>/sup>,台盼蓝染色(95±1)%呈阴性。在细胞因子GM-CSF及TNF-α联合作用下,经14 d体外培养,CD34+>/sup>干细胞发育为成熟树突状细胞,扩增10~20倍 ......
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