老龄鼠慢性脑缺血后B7T促神经发生与认知改善的相关分析(2)
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1.2 学习记忆功能评估 采用MT-200 Morris水迷宫视频跟踪系统，定位航行实验评估空间学习能力，空间探索实验评估空间记忆能力。评估实验前1 d，大鼠在无逃逸平台的水池中适应性游泳2 min。定位航行实验：连续5 d，每天上午将大鼠面向池壁从不同象限入水，找到平台后站立15 s，记录其找到隐匿平台所耗的逃逸时间，再从平台上移开休息60 s后进行下一轮实验。若在120 s内大鼠未找到平台，则引导上平台，逃逸时间记为120 s。空间探索实验：完成定位航行实验后撤去平台，从平台所在的对面象限中将大鼠放入水池，记录2 min内穿过平台所在区域的次数及停留于平台所在象限的时间。
1.3 免疫组化染色与图像分析 完成水迷宫实验后立即处死，于前囟后3.7 mm处取海马组织制片染色。免疫组化染色采用BrdU抗体及HRP标记兔抗绵羊二抗(华生生物产品)完成，设PBS为阴性对照，BrdU以细胞核出现棕色颗粒为阳性。先在低倍镜下(40×)初选海马DG区，再在高倍镜下(400×)随机选定起始区后连续采集5个视野，采用标准网格记录BrdU阳性细胞数。
1.4 统计学处理 采用SPSS 13.0软件处理数据，数值用均数±标准差(x±s)表示。定位航行实验的组间比较采用LSD法重复测量数据方差分析，空间记忆功能与BrdU阳性细胞数量的相关性分析采用Pearson法，其他数据采用单因素方差分析。P<0.05为差异有统计学意义。
2 结果
2.1 大鼠认知功能变化 定位航行实验发现，随着训练天数的增加，各组大鼠逃逸时间呈逐渐缩短的趋势(见表1)。组间整体分析，2VO-Saline组逃逸时间明显长于Sham-saline组(P<0.01)；2VO-B7T组明显短于2VO-Saline组(P<0.05)。在空间探索实验中，2VO-saline组在平台所在区域停留时间为(24.17±8.15) s，较Sham-Saline组的(43.10±11.96) s明显减少(P<0.05)；2VO-Saline组跨越平台所在区域次数为(5.17±2.14)，较Sham-Saline组的(14.14±2.34)明显减少(P<0.01) ......
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