二甲双胍通过抑制MAPK信号通路增强卵巢癌细胞对顺铂的敏感性(2)
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本研究首先观察二甲双胍对卵巢癌细胞增殖的影响,以及二甲双胍是否可增强顺铂的化疗敏感性,并通过检测二甲双胍对化疗药物相关的重要信号通路MAPK信号通路的调节作用来探讨相关的作用机制。以期寻找能提高卵巢癌化疗敏感性的新的治疗方案。
1 材料与方法
1.1 细胞系和试剂 人卵巢浆液性乳头状囊腺癌细胞系SKOV3,中、高分化,贴壁生长,购于中国医学科学院细胞库,置于37 ℃、5% CO2培养箱中培养。细胞系常规3~5 d传代。兔抗人p38 MAPK多克隆抗体、兔抗人P-p38 MAPK单克隆抗体;兔抗人AMPK多克隆抗体、兔抗人P-AMPK单克隆抗体,兔抗人GAPDH单克隆抗体购自Cell signaling公司;二甲双胍、顺铂购自美国Sigma公司,胎牛血清购自杭州四季青公司;Western blotting检测试剂盒购自武汉博士德公司;Trizol 试剂购自美国Invitrogen公司;BrdU标记及检测试剂盒购自德国Roche公司。
1.2 方法
1.3 统计学处理 采用SPSS 17.0统计学软件对数据进行处理,组间差异采用单因素方差分析,以P<0.05为差异有统计学意义。
2 结果
2.1 二甲双胍抑制卵巢癌细胞增殖的情况 二甲双胍能够抑制卵巢癌细胞增殖,并且这种抑制作用能够被Compound C所削弱。随着二甲双胍浓度(1×10-3 mol/L,1×10-4 mol/L,1×10-5 mol/L)的增加,其对卵巢癌细胞SKOV3增殖的抑制作用逐渐增强(*P<0.05,**P<0.01)。其中1×10-4 mol/L
和1×10-5 mol/L的二甲双胍能够显著抑制子宫内膜癌细胞的生长 ......
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