2.3 SP(side population)细胞亚群 有学者认为，肿瘤干细胞处于相对静止期，细胞膜表面高表达ATP结合盒转运蛋白(ABCG2)等ABC转运子，能将DNA增补性荧光染料Hoechst33342泵出而使细胞不被染色，但其他细胞不具有此功能[6-7]。利用荧光染色结合流式细胞分选技术，将没有荧光、未被染色的细胞分选出来，即为SP细胞。正常乳腺组织中分离出的SP细胞，在悬浮培养状态下生长可形成细胞微球，移植到小鼠身上能够生成完整的乳腺组织，提示可能在SP细胞中乳腺干细胞含量较高[8]。并且，在乳腺癌细胞株中分离出的SP细胞接种于免疫缺陷小鼠时，发现其具有较强致瘤能力，提示这类SP细胞中可能富含乳腺癌干细胞。但该荧光染料对细胞的毒性削弱了这种分选方法的可靠性。

    2.4 乳腺微球体培养法 研究表明，已分化的细胞不能在无血清培养基上正常生长，而乳腺癌细胞可以在含碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)、表皮生长因子(EGF)的无血清培养液中悬浮生长并形成微球体，该微球体中富含CD44+CD24-/low细胞，不表达分化标志物，当在分化条件下培养时，表现多系分化的能力，致瘤性也明显增强，并且此微球体经酶分解后可连续传代，表明无血清悬浮培养法可成功分离出乳腺癌干细胞，并已成为体外培养乳腺癌干细胞的一种常规方法[9-10] ......