1.3 反应体系 抽取外周血2 mL，3000 rpm，离心2 min，取白细胞层及血浆1000 μL，13 000 rpm，离心5 min，收集沉淀，纯水洗涤3次。上清液2 μL，8000 rpm 8 s。PCR循环条件：(1)93 ℃ 2 min；(2)93 ℃ 45 s→55 ℃ 60 s→10循环；(3)93 ℃ 30 s→55 ℃ 45 s→30循环。

    1.4 血浆游离EBV-DNA含量的计算 计算公式为C=Q×(VDNA/VPCR)×(1/Vext)，其中C为血浆DNA拷贝数值(copies/mL)，Q为经PCR扩增后计算机检测的原始拷贝数值，VPCR是用于PCR扩增的DNA的体积，VDNA为提取的DNA稀释液体积。

    1.5 统计学处理 使用SPSS 18.0统计分析软件包进行结果分析，EBV-DNA拷贝数及年龄经正态性检验后，不满足正态分布者用中位数及四分位间距表示，组间差异采用秩和检验，有差异者进一步进行两两比较；满足正态分布者用(x±s)表示，组间差异比较采用方差分析；组间性别比比较采用 字2检验 ......