缺氧缺血性脑病新生儿外周血淋巴细胞钟基因表达的变化(2)
1.2 仪器与试剂 美国Perkin Elmer仪器有限公司96孔温度梯度PCR扩增仪(GeneAmp PCR system 9600)；美国BIO-RAD公司电泳系统(170-3930 Mini Trans-Blot Electrophoretic Transfer Cell)；日本三洋-60 ℃低温冰箱；Ficoll淋巴细胞分离液，上海华精生物高科技有限公司；TRIzol Reagent：Invitrogen Life Technologies。1.3 PCR引物 PCR引物由上海生工生物工程技术服务有限公司合成。Clock和Bmal1 mRNA及内对照β-actin的上、下游引物如下：
内对照β-actin引物：(产物大小227 bp)：上游引物P1 5'-GTA AAG ACC TCT ATG CCA ACA-3'；下游引物P2 5'-GGA CTC ATC GTA CTC CTG CT-3'。
Clock引物：(产物大小433 bp)：上游引物P5 5'-CAG GGC ACC ACC CAT AAT–3'；下游引物P6 5'-CCG AGA AGA GGC AGA AGG-3' ......
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