1.2 实验方法

    1.2.1 细胞培养 人结肠癌CHT116和HT29细胞复苏后采用RPMI 1640培养液、37 ℃、5%CO2培养箱中培养，2～3 d换液1次，取对数期生长细胞用于检测。每组实验重复3次。

    1.2.2 MTT法检测细胞抑制率 取对数生长期细胞，调整细胞悬液密度为5×104个/mL，每孔200 ?L铺于96孔板。培养24 h后细胞贴壁，弃去培养液，加入不同浓度(7.5、15、30、60、120 ?g/mL)青蒿琥酯，每种浓度设5个复孔，每孔200 ?L。同时设置空白孔(只加培养液)、阴性对照孔(只加细胞和培养液)。37 ℃、5%CO2：培养箱中分别培养48 h后弃去培养液，每孔加入20 ?L MTT溶液(MTT质量浓度为5 mg/mL)，继续培养4 h后终止培养。弃去培养液，每孔加入二甲基亚砜(DMSO)150 ?L，于摇床低速振荡10 min。在酶标仪490 nm波长处测量每孔的吸光度(A)值。整理数据后计算细胞抑制率，使用SPSS 13.0软件计算IC50值。每组实验重复5次。

    细胞抑制率=[1-(实验孔A值-空白孔A值)/(阴性对照孔A值-空白孔A值)]×100% ......