妊娠晚期HPV潜伏感染对妊娠结局的影响探讨(2)
1.2.1 阴道炎判定 收集研究对象阴道分泌物,放入检测管中,通过试管显色反应判定细菌性阴道炎情况,阴性为试管内颜色从黄色变为黄绿色或者不变,阳性为试管内颜色从黄色变为蓝色。念珠菌阴道炎采用革兰染色法,其阳性检出率为80%。取分泌物涂片、固定后,革兰染色,置显微镜下观察,可见成群革兰染色阳性的卵圆形孢子和假菌丝。刚果红染色或PAS染色法染色后镜检,其阳性率均比直接镜检法高。革兰染色,孢子和假菌丝染成兰色;刚果红和PAS染色,孢子和假菌丝则染成红色。滴虫性阴道炎常用巴氏染色涂片作出诊断。1.2.2 HPV含量的测定 采用荧光定量PCR技术进行宫颈分泌物和脱落细胞中HPV含量的测定,首先将标本室温解冻,离心机12 000 r/min进行离心10 min,抛弃上清液,通过移液器将残留液充分的吸尽,保留沉淀,加入50 μL DNA提取液进行混匀,100 ℃恒温处理,然后再离心机12 000 r/min进行离心5 min,吸取上清液5 μL,作为PCR反应模板。按照说明书进行相应的扩增、退火、延伸等操作,每一次实验要注意设定阳性质控标准物和阴性质控作为对照。
1.3 观察指标
1.3.1 观察两组研究对象阴道pH值和阴道菌群情况 主要包括阴道清洁度>2度、pH值、细菌性阴道炎、念珠菌阴道炎和滴虫阴道炎 ......
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