结核性胸积液腺苷脱氨酶2活性及免疫组化研究(2)
2 结果
2.1 患者ADA1与ADA2情况比较 患者结核性胸积液中总ADA为(51.88±23.02)U/L，ADA1为(13.04±7.94)U/L，ADA2为(38.84±18.71)，ADA2活性占总ADA的74.8%，ADA2活性高于ADA1，差异有统计学意义(t=8.48，P<0.01)。
2.2 结核性胸积液活检的胸膜组织免疫组化结果 PBS代替一抗(ADA2抗体)免疫组化的阴性对照，显示胸膜组织的各种细胞无棕黄色颗粒沉着。结核性胸积液胸膜组织的ADA2免疫组化(图1)，可见巨噬细胞、朗格汉斯巨细胞和上皮样细胞被深染，胞浆和胞膜有大量的棕黄色沉着，淋巴细胞、成纤维细胞和其他细胞无棕黄色沉着；结核性胸积液胸膜组织的ADA2(图2)和巨噬细胞表面标志物CD68(图3)的免疫组化均可见巨噬细胞、朗格汉斯巨细胞和上皮样细胞被深染，胞浆和胞膜有大量的棕黄色沉着，其他细胞无棕黄色沉着。图2和图3的染色效果相似。
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3 讨论
本研究显示结核性胸腔积液总ADA活性中，ADA2平均占74.8%，其总ADA活性主要是由ADA2所构成，提示结核性胸腔积液总ADA活性升高主要由ADA2所致。胸膜组织ADA2免疫组化结果和巨噬细胞表面标志物CD68免疫组化结果相似，巨噬细胞、朗格汉斯巨细胞和上皮样细胞被深染棕黄色，显示ADA2来源于巨噬细胞、上皮样细胞和朗格汉斯巨细胞。结核性炎症渗出的细胞常以单核细胞为主，单核细胞经血管进入组织后演变为巨噬细胞，活化的巨噬细胞吞食消化结核分枝杆菌后转化而成上皮样细胞，多个上皮样细胞融合成朗格汉斯巨细胞，而结核菌的菌体脂质促使巨噬细胞转变成上皮样细胞和朗格汉斯巨细胞，所以这些细胞都属同一细胞来源[4]。Zavialov等[5]报道单核细胞转化为巨噬细胞时会产生ADA2；而在炎症反应时，巨噬细胞能分泌ADA2[6]。ADA2能诱导单核细胞分化成巨噬细胞，并且使巨噬细胞和CD4+T细胞增殖，另一种同功酶ADA1则不能诱导单核细胞分化成巨噬细胞，在结核性胸积液中含有大量的巨噬细胞和CD4+T细胞[7]，宿主抗结核免疫主要是通过以T淋巴细胞介导、巨噬细胞为效应的细胞免疫反应，所以ADA2使巨噬细胞和CD4+T细胞增殖的作用可能有利于机体抗结核。结核性胸积液ADA2活性升高主要是由于宿主单核巨噬细胞、上皮样细胞、朗格汉斯巨细胞等和结核菌相互作用的结果。
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综上所述，结核性胸积液的ADA活性主要由ADA2构成，ADA2源自巨噬细胞、上皮样细胞和朗格汉斯巨细胞。
参考文献
[1]田瑞雪.干扰素γ、白细胞介素12及腺苷脱氨酶同工酶对结核性胸腔积液的诊断价值[J].中华结核和呼吸杂志，2004，27(7)：6-9.
[2] Ungerer J P，Oosthuizen H M，Bissbort S H，et al.Serum adenosine deaminase：isoenzymes and diagnostic application[J].Clin Chem，1992，38(7)：1322-1326.
[3] Muraoka T，Katsuramaki T，Shiraishi H，et al.Automated enzymatic measurement of adenosine deaminase isoenzyme activities in serum[J].Anal Biochem，1990，187(2)：268-272.
, 百拇医药
[4] Van Crevel R，Ottenhoff T H，Van der Meer J W.Innate immunity to Mycobacterium tuberculosis[J].Clin Microbiol Rev，2002，15(2)：294-309.
[5] Zavialov A V，Gracia E，Glaichenhaus N，et al.Human adenosine deaminase 2 induces differentiation of monocytes into macrophages and stimulates proliferation of T helper cells and macrophages[J].J Leukoc Biol，2010，88(2)：279-290.
[6] Conlon B A，Law W R.Macrophages are a source of extracellular adenosine deaminase-2 during inflammatory responses[J].Clin Exp Immunol，2004，138(1)：14-20.
[7] Valdes L，Pose A，San J E，et al.Tuberculous pleural effusions[J].Eur J Intern Med，2003，14(2)：77-88.
(收稿日期：2015-01-16) (本文编辑：陈丹云), 百拇医药(李方知 黄广雄 卢峰岳)
2.1 患者ADA1与ADA2情况比较 患者结核性胸积液中总ADA为(51.88±23.02)U/L，ADA1为(13.04±7.94)U/L，ADA2为(38.84±18.71)，ADA2活性占总ADA的74.8%，ADA2活性高于ADA1，差异有统计学意义(t=8.48，P<0.01)。
2.2 结核性胸积液活检的胸膜组织免疫组化结果 PBS代替一抗(ADA2抗体)免疫组化的阴性对照，显示胸膜组织的各种细胞无棕黄色颗粒沉着。结核性胸积液胸膜组织的ADA2免疫组化(图1)，可见巨噬细胞、朗格汉斯巨细胞和上皮样细胞被深染，胞浆和胞膜有大量的棕黄色沉着，淋巴细胞、成纤维细胞和其他细胞无棕黄色沉着；结核性胸积液胸膜组织的ADA2(图2)和巨噬细胞表面标志物CD68(图3)的免疫组化均可见巨噬细胞、朗格汉斯巨细胞和上皮样细胞被深染，胞浆和胞膜有大量的棕黄色沉着，其他细胞无棕黄色沉着。图2和图3的染色效果相似。
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3 讨论
本研究显示结核性胸腔积液总ADA活性中，ADA2平均占74.8%，其总ADA活性主要是由ADA2所构成，提示结核性胸腔积液总ADA活性升高主要由ADA2所致。胸膜组织ADA2免疫组化结果和巨噬细胞表面标志物CD68免疫组化结果相似，巨噬细胞、朗格汉斯巨细胞和上皮样细胞被深染棕黄色，显示ADA2来源于巨噬细胞、上皮样细胞和朗格汉斯巨细胞。结核性炎症渗出的细胞常以单核细胞为主，单核细胞经血管进入组织后演变为巨噬细胞，活化的巨噬细胞吞食消化结核分枝杆菌后转化而成上皮样细胞，多个上皮样细胞融合成朗格汉斯巨细胞，而结核菌的菌体脂质促使巨噬细胞转变成上皮样细胞和朗格汉斯巨细胞，所以这些细胞都属同一细胞来源[4]。Zavialov等[5]报道单核细胞转化为巨噬细胞时会产生ADA2；而在炎症反应时，巨噬细胞能分泌ADA2[6]。ADA2能诱导单核细胞分化成巨噬细胞，并且使巨噬细胞和CD4+T细胞增殖，另一种同功酶ADA1则不能诱导单核细胞分化成巨噬细胞，在结核性胸积液中含有大量的巨噬细胞和CD4+T细胞[7]，宿主抗结核免疫主要是通过以T淋巴细胞介导、巨噬细胞为效应的细胞免疫反应，所以ADA2使巨噬细胞和CD4+T细胞增殖的作用可能有利于机体抗结核。结核性胸积液ADA2活性升高主要是由于宿主单核巨噬细胞、上皮样细胞、朗格汉斯巨细胞等和结核菌相互作用的结果。
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综上所述，结核性胸积液的ADA活性主要由ADA2构成，ADA2源自巨噬细胞、上皮样细胞和朗格汉斯巨细胞。
参考文献
[1]田瑞雪.干扰素γ、白细胞介素12及腺苷脱氨酶同工酶对结核性胸腔积液的诊断价值[J].中华结核和呼吸杂志，2004，27(7)：6-9.
[2] Ungerer J P，Oosthuizen H M，Bissbort S H，et al.Serum adenosine deaminase：isoenzymes and diagnostic application[J].Clin Chem，1992，38(7)：1322-1326.
[3] Muraoka T，Katsuramaki T，Shiraishi H，et al.Automated enzymatic measurement of adenosine deaminase isoenzyme activities in serum[J].Anal Biochem，1990，187(2)：268-272.
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[4] Van Crevel R，Ottenhoff T H，Van der Meer J W.Innate immunity to Mycobacterium tuberculosis[J].Clin Microbiol Rev，2002，15(2)：294-309.
[5] Zavialov A V，Gracia E，Glaichenhaus N，et al.Human adenosine deaminase 2 induces differentiation of monocytes into macrophages and stimulates proliferation of T helper cells and macrophages[J].J Leukoc Biol，2010，88(2)：279-290.
[6] Conlon B A，Law W R.Macrophages are a source of extracellular adenosine deaminase-2 during inflammatory responses[J].Clin Exp Immunol，2004，138(1)：14-20.
[7] Valdes L，Pose A，San J E，et al.Tuberculous pleural effusions[J].Eur J Intern Med，2003，14(2)：77-88.
(收稿日期：2015-01-16) (本文编辑：陈丹云), 百拇医药(李方知 黄广雄 卢峰岳)