两造船厂一线员工锰暴露状况评价(2)
1.5.1 仪器分析条件 检测波长279.6 nm，灯电流7.5 mA，光谱宽度0.2 nm，进样量20 μL，氩气流量200 mL/min(原子化停气)，原子化石墨炉升温程序为干燥阶段用20 s从60 ℃升温至120 ℃，120 ℃保持20 s；灰化阶段用20 s从120 ℃升温至800 ℃，800 ℃保持20 s；原子化2300 ℃保持5 s；清除2600 ℃保持20 s。
1.5.2 样品前处理 尿样从冰箱中取出，放置至室温，振荡器摇匀。样品与0.1%硝酸按1∶1比例混合均匀。同时，用去离子水代替尿样，与0.1%硝酸按1∶1比例混合均匀，做空白试样。
1.5.3 标准曲线制备 用0.1%硝酸将1000 μg/mL的锰标准溶液分别稀释(三级稀释)成0 μg/L、2.00 μg/L、4.00 μg/L、6.00 μg/L、8.00 μg/L、10.00 μg/L的系列溶液，按1∶1加入正常人尿液，配制成系列标准溶液。按照仪器分析条件，测定各管吸光度，各标准管吸光度减去空白管吸光度，以吸光度值为纵坐标，锰浓度为横坐标绘制标准曲线。
, http://www.100md.com
1.5.4 方法的准确度及精密度分析 取正常人尿样(尿锰本底值很低)摇匀后分成3份，分别加入不同量的锰标准溶液，配制成低、中、高3个浓度的样品，每个样品平行测定6次，计算标准偏差。
1.5.5 样品测定 石墨炉原子吸收光谱法直接检测尿样法。
1.6 职业锰暴露评价方法 尿锰水平反映职业工人近期锰接触情况。国家标准《职业性慢性锰中毒诊断标准及处理原则(GB3232-82)》和美国田纳西州Oak Ridge国家实验室采用的尿锰水平10 μg/L作为锰暴露过量标准。以此为标准，分别用两造船厂职工尿样锰含量做比较，评价职工锰暴露状况或被污染情况；并对两家企业在线职工尿样做对比，判断职工工作环境[7-8]。
1.7 职工健康评价方法 美国健康和人类服务公共卫生服务部有毒物质和疾病登记处标准：人正常尿锰水平为1～8 μg/L，在6～88岁个体平均尿锰水平为1.19 μg/L。以此标准为依据，对两造船厂在线职工做健康评价[9-10]。
, http://www.100md.com
1.8 统计学处理
1.8.1 化学分析数据处理方法 使用Solaar AA系统进行数据处理。尿样锰浓度计算方法：X=F×C×K，X-尿锰浓度(μg/L)，C-标准曲线查的稀释尿样中锰浓度(μg/L)，F-尿样稀释倍数，K-尿样换算成标准比重(1.020)下的浓度校正系数。
1.8.2 锰暴露与健康评价统计方法 使用SPSS 19.0统计学软件做数据分析。
2 结果
根据本文试验方法，尿锰浓度在0～20 μg/L范围内，与吸光度有良好的线性关系，回归方程为Y=0.03153x-0.0001，相关系数r=0.9990，空白样品连续检测11次，计算空白值标准偏差，按3倍标准偏差计算方法检出限，方法检出限为1.38 μg/L。尿样添加回收率分析见表1。职业污染状况评价结果见表2。职工健康状况评价结果见表3。
, http://www.100md.com
3 讨论
尿锰目前还没有标准分析方法，最常见的分析方法有化学比色法、原子吸收光谱法、电感耦合等离子体发射光谱法、电化学分析法等.各种方法都有优劣。戴伟民等[6]报道用石墨炉原子吸收法直接测定尿锰，样品不需消化，方便、快速、准确、灵敏度高。线性范围5.0～60.0 L，相关系数r=0.9995，回收率为96.5%～100%，与国标高锰酸钾光度法测定尿锰比较差异无统计学意义。本方法简单，测定结果准确可靠。缪英等[11]使用火焰原子吸收分光光度法测定尿锰，采用干灰法对尿样进行消化，定容后用火焰原子吸收光谱法测定。该方法简便快速，精密度和准确度均符合要求，适用于大批量尿锰测定。杨再见等[12]报道了用高碘酸钾集锰法进行尿锰含量测定锰矿企业工人的尿锰。笔者比较了这3种方法，石墨炉原子吸收法更快速，方便，准确，灵敏而且所需要的尿样标本少，前处理简单。所以本实验采用石墨炉原子吸收法机体改进剂选择0.1%的硝酸。
锰在体内主要由胆汁排泄，经粪便排出体外，只有约1%经尿排出。锰在血液半衰期为10～42 d，在尿液半衰期少于30 h，尿锰只能反映过去1 d或2 d的锰暴露状况。因此，尿锰并不是较好的锰暴露评价指标，但却可以作为最近锰暴露或锰接触的评价指标[13]。这次尿样采集的对象是在线职工。晨尿与24 h尿样的采集，经过文献查阅，尿锰测定大多数选择采集晨尿，本文未就采集晨尿与24 h尿进行进一步方法探讨。
, http://www.100md.com
锰职业接触工人生物标志物的报道很多，江培等[14]报道，锰暴露后对神经系统损害及铁代谢的影响在男女两性间可能存在差异，长期锰暴露对男性血小板计数产生影响，尿锰并不能反映体内锰的蓄积，且不能作为机体损害的效应标志物[14]。张文静[15]报道，血锰、尿锰、尿中香草扁桃酸(VMA)均不能作为评价锰接触的接触生物标志物，尿中高香草酸(HVA)可以作为评价锰接触的效应生物标志物[15]。周远忠等[16]研究结果显示唾液锰可作为人群锰当前接触和历史接触的生物标志物。毛叶挺[17]研究结果显示，锰能导致肝功能异常和机体免疫功能下降，肝和免疫功能指标可作为锰中毒的早期检测指标。
笔者采用《工作场所空气中锰及其化合物的测定方法》(GBZ/T160.13-2004)的方法对该两厂的工人作业环境进行检测，结果显示锰极其化合物(按二氧化锰计)
8 h时间平均浓度(CTWA)超标率达24.5%，其中最大值
3.4 mg/m3，远高于国家标准。两者之间有否相关性，有待进一步分析。
过量的锰接触可以对人体造成损害，特别是神经系统损害；但锰又是人体必需元素，因此，有一定的限值范围，超出这个限值范围，就会出现损害或不足。国内没有明确的限值范围，推荐职业接触限值为0.18 μmol/L(10 μg/L)，但美国ATSDR(U.S.Agency for Toxic Substances and Disease Registry)给出了尿锰的正常范围值，用此可以评价锰摄入情况，并评估出对健康的潜在风险。, 百拇医药(孙藻等)
1.5.2 样品前处理 尿样从冰箱中取出，放置至室温，振荡器摇匀。样品与0.1%硝酸按1∶1比例混合均匀。同时，用去离子水代替尿样，与0.1%硝酸按1∶1比例混合均匀，做空白试样。
1.5.3 标准曲线制备 用0.1%硝酸将1000 μg/mL的锰标准溶液分别稀释(三级稀释)成0 μg/L、2.00 μg/L、4.00 μg/L、6.00 μg/L、8.00 μg/L、10.00 μg/L的系列溶液，按1∶1加入正常人尿液，配制成系列标准溶液。按照仪器分析条件，测定各管吸光度，各标准管吸光度减去空白管吸光度，以吸光度值为纵坐标，锰浓度为横坐标绘制标准曲线。
, http://www.100md.com
1.5.4 方法的准确度及精密度分析 取正常人尿样(尿锰本底值很低)摇匀后分成3份，分别加入不同量的锰标准溶液，配制成低、中、高3个浓度的样品，每个样品平行测定6次，计算标准偏差。
1.5.5 样品测定 石墨炉原子吸收光谱法直接检测尿样法。
1.6 职业锰暴露评价方法 尿锰水平反映职业工人近期锰接触情况。国家标准《职业性慢性锰中毒诊断标准及处理原则(GB3232-82)》和美国田纳西州Oak Ridge国家实验室采用的尿锰水平10 μg/L作为锰暴露过量标准。以此为标准，分别用两造船厂职工尿样锰含量做比较，评价职工锰暴露状况或被污染情况；并对两家企业在线职工尿样做对比，判断职工工作环境[7-8]。
1.7 职工健康评价方法 美国健康和人类服务公共卫生服务部有毒物质和疾病登记处标准：人正常尿锰水平为1～8 μg/L，在6～88岁个体平均尿锰水平为1.19 μg/L。以此标准为依据，对两造船厂在线职工做健康评价[9-10]。
, http://www.100md.com
1.8 统计学处理
1.8.1 化学分析数据处理方法 使用Solaar AA系统进行数据处理。尿样锰浓度计算方法：X=F×C×K，X-尿锰浓度(μg/L)，C-标准曲线查的稀释尿样中锰浓度(μg/L)，F-尿样稀释倍数，K-尿样换算成标准比重(1.020)下的浓度校正系数。
1.8.2 锰暴露与健康评价统计方法 使用SPSS 19.0统计学软件做数据分析。
2 结果
根据本文试验方法，尿锰浓度在0～20 μg/L范围内，与吸光度有良好的线性关系，回归方程为Y=0.03153x-0.0001，相关系数r=0.9990，空白样品连续检测11次，计算空白值标准偏差，按3倍标准偏差计算方法检出限，方法检出限为1.38 μg/L。尿样添加回收率分析见表1。职业污染状况评价结果见表2。职工健康状况评价结果见表3。
, http://www.100md.com
3 讨论
尿锰目前还没有标准分析方法，最常见的分析方法有化学比色法、原子吸收光谱法、电感耦合等离子体发射光谱法、电化学分析法等.各种方法都有优劣。戴伟民等[6]报道用石墨炉原子吸收法直接测定尿锰，样品不需消化，方便、快速、准确、灵敏度高。线性范围5.0～60.0 L，相关系数r=0.9995，回收率为96.5%～100%，与国标高锰酸钾光度法测定尿锰比较差异无统计学意义。本方法简单，测定结果准确可靠。缪英等[11]使用火焰原子吸收分光光度法测定尿锰，采用干灰法对尿样进行消化，定容后用火焰原子吸收光谱法测定。该方法简便快速，精密度和准确度均符合要求，适用于大批量尿锰测定。杨再见等[12]报道了用高碘酸钾集锰法进行尿锰含量测定锰矿企业工人的尿锰。笔者比较了这3种方法，石墨炉原子吸收法更快速，方便，准确，灵敏而且所需要的尿样标本少，前处理简单。所以本实验采用石墨炉原子吸收法机体改进剂选择0.1%的硝酸。
锰在体内主要由胆汁排泄，经粪便排出体外，只有约1%经尿排出。锰在血液半衰期为10～42 d，在尿液半衰期少于30 h，尿锰只能反映过去1 d或2 d的锰暴露状况。因此，尿锰并不是较好的锰暴露评价指标，但却可以作为最近锰暴露或锰接触的评价指标[13]。这次尿样采集的对象是在线职工。晨尿与24 h尿样的采集，经过文献查阅，尿锰测定大多数选择采集晨尿，本文未就采集晨尿与24 h尿进行进一步方法探讨。
, http://www.100md.com
锰职业接触工人生物标志物的报道很多，江培等[14]报道，锰暴露后对神经系统损害及铁代谢的影响在男女两性间可能存在差异，长期锰暴露对男性血小板计数产生影响，尿锰并不能反映体内锰的蓄积，且不能作为机体损害的效应标志物[14]。张文静[15]报道，血锰、尿锰、尿中香草扁桃酸(VMA)均不能作为评价锰接触的接触生物标志物，尿中高香草酸(HVA)可以作为评价锰接触的效应生物标志物[15]。周远忠等[16]研究结果显示唾液锰可作为人群锰当前接触和历史接触的生物标志物。毛叶挺[17]研究结果显示，锰能导致肝功能异常和机体免疫功能下降，肝和免疫功能指标可作为锰中毒的早期检测指标。
笔者采用《工作场所空气中锰及其化合物的测定方法》(GBZ/T160.13-2004)的方法对该两厂的工人作业环境进行检测，结果显示锰极其化合物(按二氧化锰计)
8 h时间平均浓度(CTWA)超标率达24.5%，其中最大值
3.4 mg/m3，远高于国家标准。两者之间有否相关性，有待进一步分析。
过量的锰接触可以对人体造成损害，特别是神经系统损害；但锰又是人体必需元素，因此，有一定的限值范围，超出这个限值范围，就会出现损害或不足。国内没有明确的限值范围，推荐职业接触限值为0.18 μmol/L(10 μg/L)，但美国ATSDR(U.S.Agency for Toxic Substances and Disease Registry)给出了尿锰的正常范围值，用此可以评价锰摄入情况，并评估出对健康的潜在风险。, 百拇医药(孙藻等)