基因修饰的骨髓间充质干细胞移植对大鼠急性心肌梗死的疗效观察(2)
1.2 试剂和仪器 血管内皮生长因子165、磷酸盐、0.2 g/L 乙二胺四乙酸、0.5 g/L胰蛋白酶、甲醛(体积分数10%)、小量质粒抽提试剂盒、jet-PEI 细胞转染试剂盒、CM-DiI (Cell TrackerTM C-7001)、DMEM低糖培养基(含10 000u肝素)、HP/Sonos 5 500,7.5 MHz探头、ElivisionTM plus两步试剂盒1.3 方法
1.3.1 急性心肌梗死动物模型的制备 本研究模型制备的方法为:首先麻醉大鼠,本研究选用的麻醉方式为腹腔注射麻醉,麻醉药选用1%的戊巴比妥钠40~50 mg/kg。麻醉成功后,需气管插管,并连接呼吸机辅助呼吸。前期工作完成后,进入模型制备阶段,助手常规消毒铺单后,由本研究统一研究人员进行手术操作,具体操作步骤如下:首先,于大鼠距胸骨左侧约0.5 cm处沿3、4肋间作纵形切口,逐层剥离后进入胸腔,将心脏充分暴露于手术视野,然后于左心耳下缘与肺动脉圆锥之间距主动脉根部2.0~3.0 mm处,结扎大鼠左冠状动脉前降支,结扎完成后,观察结扎区域是否变白,局部心肌是否运动减弱,以确定是否结扎成功 ......
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