ApoC—Ⅲ启动子C—482T和T—455C单核苷酸多态性与2型糖尿病的相关性探析(2)
1.2 方法 对两组患者体内的ApoC-Ⅲ启动子C-482T及T-455C单核苷酸多态性进行检测的方法主要是通过多态性分析，其主要为：(1)将DNA从患者的基因组中提取出来，采集患者的外周静脉血液标本并进行抗凝处理，将有核细胞从血标本中提取后，用相应蛋白酶溶解后得到基因组DNA，将其溶解到一定量的TE缓冲液中，且将DNA的浓度调整到50 ng/μL，保存后以作备用。(2)对核酸中的序列进行扩增，将DNA序列由上海生物工程有限公司进行纯化或合成。(3)对DNA进行酶切与电泳分离，用限制酶在所需基因的位点处进行分离与切割，并使用电泳的方式将所需的基因碎片进行分离，得到确切的基因部分。
1.3 观察指标 记录分析两组患者的C-482T及T-455C基因型与等位基因之间的频率情况及两组患者的T-455C与C-482T各基因型间的ApoC-Ⅲ的浓度情况。
1.4 统计学处理 采用SPSS 17.0软件对所的数据进行分析，计量资料以(x±s)表示，比较采用t检验，计数资料以率(%)表示，比较采用 字2检验，以P<0.05表示差异有统计学意义。
, 百拇医药
2 结果
2.1 两组C-482T基因型与等位基因之间的频率情况比较 两组等位基因C含量与T含量比较差异均无统计学意义(P>0.05)，见表1。
2.2 两组T-455C基因型与等位基因之间的频率情况比较 两组等位基因C含量与T含量比较差异均无统计学意义(P>0.05)，见表2。
2.3 两组T-455C与C-482T各基因型间的ApoC-Ⅲ浓度情况比较 两组T-455C各基因型间的ApoC-Ⅲ浓度比较差异均无统计学意义(P>0.05)。试验组T-455C与C-482T各基因型间的ApoC-Ⅲ浓度与对照组比较差异无统计学意义(P>0.05)。对照组-482TT基因型的ApoC-Ⅲ的浓度高于其-482CT基因型的ApoC-Ⅲ浓度，比较差异有统计学意义(P<0.05)，见表3。
3 讨论
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2型糖尿病是一种后天糖尿病类型，胰岛素的分泌异常是其主要的发病机制，最终造成血糖调节过程中的异常，近年来，有资料显示2型糖尿病患者内脏型肥胖与胰岛素抵抗存在一定的相关性[6-7]。2型糖尿病原名是成人发病性糖尿病，患者体内产生胰岛素的功能完全丧失。该疾病是以高血糖为主要特征的代谢性疾病，多饮、多食、多尿、消瘦等是其主要临床表现[8-11]。近几年来，2型糖尿病的发病率逐年攀升，已经成为危害人们健康的首要疾病，这与人口老龄化的发展趋势和人们不良的饮食生活习惯有极大的关系[12-13]。该病严重影响患者的健康水平，是临床上一种常见的内分泌系统疾病，以中老年人群居多，给患者的身体和心理带来很大的影响。大多数患者由于对疾病缺少正确的认知，心里有恐慌、张紧等不良情绪，会出现情绪低落或自暴自弃的情况，对治疗不抱有希望，因此，全面认识2型糖尿病的临床相关评估对早期诊断并治疗有重要意义。
该研究结果中表明，2型糖尿病患者体内的ApoC-Ⅲ启动子C-482T与T-455C等位基因C、T与正常人之间并没有较为明显的差异，即两种物质的基因的含量并不能够证明其与2型糖尿病发病之间的关系。临床上对于ApoC-Ⅲ对2型糖尿病患者的影响已经存在较多的研究，并且经过多个试验与研究表明，血清的高密度脂蛋白中含有ApoC-Ⅲ物质，该物质是关于机体代谢疾病综合症的一种相对较为独立的危险因子，并且该物质与2型糖尿病患者的发病之间存在着密切的联系。经过相应报道证实，ApoC-Ⅲ在患者的血清中含量增加时，能够促进患者胰岛细胞的快速凋亡，故而，降低患者体内的ApoC-Ⅲ含量，不仅能够改善患者胰岛细胞的部分功能，还可以预防2型糖尿病的发生[14]。但临床上对于ApoC-Ⅲ如何引起胰岛细胞的快速凋亡并没有明确的解释，因此，本研究中对ApoC-Ⅲ中的两种主要物质T-455C单核苷酸多态性及Ⅲ启动子C-482T的含量与2型糖尿病的发病之间的关系进行研究，以便于确定ApoC-Ⅲ中主要影响2型糖尿病发生的因素，并针对该物质进行进一步的准确监测与疾病的预防，但本研究中的结果显示，T-455C单核苷酸多态性、Ⅲ启动子C-482T两种物质与2型糖尿病之间没有确切的联系，故而临床上需对发病的因素进行进一步的研究[15]。
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与此同时，对两组研究对象进行基因型检测后，两组T-455C与C-482T各基因型间的ApoC-Ⅲ浓度比较差异均无统计学意义(P>0.05)。该结果证明2型糖尿病患者发病的主要原因与这两种物质之间没有联系。然而，对照组-482TT基因型的ApoC-Ⅲ的浓度高于其-482CT基因型的ApoC-Ⅲ浓度，比较差异有统计学意义(P<0.05)，可以根据两种基因的序列检测准确的监视正常人体内的ApoC-Ⅲ血清变化情况，确保其能够在出现异常情况的早期得到及时且有效的检测，具有重要的临床作用。
在ApoC-Ⅲ基因中，其启动因子的区域中有胰岛素反应元件的存在，并且胰岛素能够将ApoC-Ⅲ基因中的表达过程进行下调，从而发挥其控制血糖的作用，并且如果该基因出现突变，则导致胰岛素的降糖作用减弱甚至消失，本研究中的T-455C与C-482T两个基因的突变位点便位于胰岛素反应元件当中。临床上，对于糖尿病等代谢综合征的发病原因主要是胰岛素的功能抵抗，并且，目前在我国，随着医学技术水平的不断发展，已出现对于T-455C与C-482T两个基因位点的研究，但结果均是两种物质单独出现时与2型糖尿病的发病之间并没有突出的关系，即不存在明显的作用，故而，临床上应加大对此方面的研究，以便于提高2型糖尿病患者的临床治疗效果，改善患者的生活质量，增加患者对临床治疗效果的满意程度，具有十分重要的临床意义。
综上所述，ApoC-Ⅲ启动子C-482T及T-455C单核苷酸多态性与2型糖尿病的发病过程之间没有较为明显的相关性，但健康人ApoC-Ⅲ血清水平与体内的C-482T多态性的变化之间有一定的联系。, 百拇医药(张华 刁玉荃 邢卿)
1.3 观察指标 记录分析两组患者的C-482T及T-455C基因型与等位基因之间的频率情况及两组患者的T-455C与C-482T各基因型间的ApoC-Ⅲ的浓度情况。
1.4 统计学处理 采用SPSS 17.0软件对所的数据进行分析，计量资料以(x±s)表示，比较采用t检验，计数资料以率(%)表示，比较采用 字2检验，以P<0.05表示差异有统计学意义。
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2 结果
2.1 两组C-482T基因型与等位基因之间的频率情况比较 两组等位基因C含量与T含量比较差异均无统计学意义(P>0.05)，见表1。
2.2 两组T-455C基因型与等位基因之间的频率情况比较 两组等位基因C含量与T含量比较差异均无统计学意义(P>0.05)，见表2。
2.3 两组T-455C与C-482T各基因型间的ApoC-Ⅲ浓度情况比较 两组T-455C各基因型间的ApoC-Ⅲ浓度比较差异均无统计学意义(P>0.05)。试验组T-455C与C-482T各基因型间的ApoC-Ⅲ浓度与对照组比较差异无统计学意义(P>0.05)。对照组-482TT基因型的ApoC-Ⅲ的浓度高于其-482CT基因型的ApoC-Ⅲ浓度，比较差异有统计学意义(P<0.05)，见表3。
3 讨论
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2型糖尿病是一种后天糖尿病类型，胰岛素的分泌异常是其主要的发病机制，最终造成血糖调节过程中的异常，近年来，有资料显示2型糖尿病患者内脏型肥胖与胰岛素抵抗存在一定的相关性[6-7]。2型糖尿病原名是成人发病性糖尿病，患者体内产生胰岛素的功能完全丧失。该疾病是以高血糖为主要特征的代谢性疾病，多饮、多食、多尿、消瘦等是其主要临床表现[8-11]。近几年来，2型糖尿病的发病率逐年攀升，已经成为危害人们健康的首要疾病，这与人口老龄化的发展趋势和人们不良的饮食生活习惯有极大的关系[12-13]。该病严重影响患者的健康水平，是临床上一种常见的内分泌系统疾病，以中老年人群居多，给患者的身体和心理带来很大的影响。大多数患者由于对疾病缺少正确的认知，心里有恐慌、张紧等不良情绪，会出现情绪低落或自暴自弃的情况，对治疗不抱有希望，因此，全面认识2型糖尿病的临床相关评估对早期诊断并治疗有重要意义。
该研究结果中表明，2型糖尿病患者体内的ApoC-Ⅲ启动子C-482T与T-455C等位基因C、T与正常人之间并没有较为明显的差异，即两种物质的基因的含量并不能够证明其与2型糖尿病发病之间的关系。临床上对于ApoC-Ⅲ对2型糖尿病患者的影响已经存在较多的研究，并且经过多个试验与研究表明，血清的高密度脂蛋白中含有ApoC-Ⅲ物质，该物质是关于机体代谢疾病综合症的一种相对较为独立的危险因子，并且该物质与2型糖尿病患者的发病之间存在着密切的联系。经过相应报道证实，ApoC-Ⅲ在患者的血清中含量增加时，能够促进患者胰岛细胞的快速凋亡，故而，降低患者体内的ApoC-Ⅲ含量，不仅能够改善患者胰岛细胞的部分功能，还可以预防2型糖尿病的发生[14]。但临床上对于ApoC-Ⅲ如何引起胰岛细胞的快速凋亡并没有明确的解释，因此，本研究中对ApoC-Ⅲ中的两种主要物质T-455C单核苷酸多态性及Ⅲ启动子C-482T的含量与2型糖尿病的发病之间的关系进行研究，以便于确定ApoC-Ⅲ中主要影响2型糖尿病发生的因素，并针对该物质进行进一步的准确监测与疾病的预防，但本研究中的结果显示，T-455C单核苷酸多态性、Ⅲ启动子C-482T两种物质与2型糖尿病之间没有确切的联系，故而临床上需对发病的因素进行进一步的研究[15]。
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与此同时，对两组研究对象进行基因型检测后，两组T-455C与C-482T各基因型间的ApoC-Ⅲ浓度比较差异均无统计学意义(P>0.05)。该结果证明2型糖尿病患者发病的主要原因与这两种物质之间没有联系。然而，对照组-482TT基因型的ApoC-Ⅲ的浓度高于其-482CT基因型的ApoC-Ⅲ浓度，比较差异有统计学意义(P<0.05)，可以根据两种基因的序列检测准确的监视正常人体内的ApoC-Ⅲ血清变化情况，确保其能够在出现异常情况的早期得到及时且有效的检测，具有重要的临床作用。
在ApoC-Ⅲ基因中，其启动因子的区域中有胰岛素反应元件的存在，并且胰岛素能够将ApoC-Ⅲ基因中的表达过程进行下调，从而发挥其控制血糖的作用，并且如果该基因出现突变，则导致胰岛素的降糖作用减弱甚至消失，本研究中的T-455C与C-482T两个基因的突变位点便位于胰岛素反应元件当中。临床上，对于糖尿病等代谢综合征的发病原因主要是胰岛素的功能抵抗，并且，目前在我国，随着医学技术水平的不断发展，已出现对于T-455C与C-482T两个基因位点的研究，但结果均是两种物质单独出现时与2型糖尿病的发病之间并没有突出的关系，即不存在明显的作用，故而，临床上应加大对此方面的研究，以便于提高2型糖尿病患者的临床治疗效果，改善患者的生活质量，增加患者对临床治疗效果的满意程度，具有十分重要的临床意义。
综上所述，ApoC-Ⅲ启动子C-482T及T-455C单核苷酸多态性与2型糖尿病的发病过程之间没有较为明显的相关性，但健康人ApoC-Ⅲ血清水平与体内的C-482T多态性的变化之间有一定的联系。, 百拇医药(张华 刁玉荃 邢卿)