百里醌抑制体外骨肉瘤细胞转移的实验研究(2)
1.5 Western印迹检测细胞中MMP-2和MMP-9的表达 裂解细胞并分离细胞蛋白质,用Bradford法测量蛋白浓度后取等量蛋白质样品(20 μg/孔),常规8% SDS-PAGE电泳,半干转膜仪转膜,5%脱脂奶粉封闭,加入特异性一抗(1∶1000)于4 ℃下孵育过夜,HRP标记的羊抗兔IgG为第二抗体(1∶2500)室温孵育1 h,ECL显色,条带曝光强度用Quantity One 4.6.2(BIO,RAD)软件分析,以β-actin为内参,通过与内参的灰度比得出目的条带的相对表达水平。1.6 统计学处理 采用SPSS 11.0软件包进行统计学处理,计量资料用(x±s)表示,正态分布变量多组间比较用方差分析,两组间比较用t检验,以P<0.05为差异有统计学意义。
2 结果
2.1 百里醌对体外骨肉瘤细胞迁移的作用 百里醌可呈浓度依赖性显著抑制SaOS-2细胞迁移(图1)。百里醌(10、20、40 μmol/L)作用SaOS-2细胞2 h后 ......
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