齐墩果酸联合二甲亚砜对生物膜中粪肠球菌抑菌作用研究(2)
1.2 药敏实验1.2.1 菌株的复苏活化 冻存管中粪肠球菌经两次传代后,细菌进入茁壮期。比浊仪调整菌液浓度至1.5×108 CFU/mL,1∶100生理盐水稀释至1.5×106 CFU/mL。
1.2.2 测定DMSO、OA最小抑菌浓度值(MIC) 分
别采用液体倍比稀释法和琼脂稀释法测定DMSO和OA的MIC值。最终DMSO浓度为80%、60%、40%、20%、10%、5%、2.5%,OA终浓度(μg/mL)为250、200、150、100、50、10。取100 μL菌悬液即刻接种摇匀,37 ℃厌氧条件下孵育培养48 h。实验重复3次。培养结束后肉眼观察结果,无细菌生长或菌落生长被完全抑制的最低药物浓度即为DMSO或OA的MIC。
1.2.3 微量棋盘稀释法 无菌96孔板中OA横排加入,DMSO纵排加入。OA的终浓度(μg/mL)分别为200、150、100、50、10、5、2.5、1.25,DMSO的终浓度分别为30%、25%、20%、15%、10%、5% ......
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