范仁根查文章周勇周建平单湘湘

    miR-590-5P通过下调靶基因S100A10表达、抑制Wnt信号通道调控肝癌细胞增殖*

    范仁根①查文章①周勇①周建平①单湘湘①

    【摘要】目的：研究miR-590-5P对肝癌细胞增殖能力的影响以及参与HCC发生发展的机制。方法：利用QPCR对肝癌细胞株miR-590-5P的表达谱系进行分析和验证，生物信息技术预测S100A10可作为miR-590-5P的潜在靶基因，并通过实时定量PCR以及Western blot进行验证。通过慢病毒载体在肝癌细胞株HepG2中过表达miR-590-5P，CCK-8法检测转染后细胞增殖，流式细胞技术检测转染后细胞周期变化，Western blot检测转染后细胞Wnt信号相关蛋白表达水平。结果：荧光定量检测结果显示，miR-590-5P在人肝癌细胞中低表达，而S100A10蛋白在肝癌细胞中高表达。S100A10 3’UTR luciferase 报告系统验证表明，miR-590-5P可以通过结合S100A10 3’UTR而抑制报告基因的表达。通过慢病毒系统在HepG2细胞中高表达miR-590-5P，可有效抑制S100A10基因的表达。在肝癌细胞HepG2中过表达miR-590-5P，可通过调控细胞周期，明显抑制Wnt信号相关蛋白：Wnt5a、cMyc、CyclinD1的表达水平，促进E-cadherin、Caspase3的表达，加速β-catenin蛋白的磷酸化，而调控细胞增殖。结论：miR-590-5P在人肝癌细胞中低表达，而S100A10基因在人肝癌细胞中过表达，S100A10为miR-590-5P的靶基因。miR-590-5P在肝癌细胞中过表达，可有效抑制S100A10基因的表达，抑制Wnt通路的激活，使肿瘤细胞停滞在G1期，从而参与肝癌细胞增殖进程。

    【关键词】miR-590-5P； 肝癌细胞

    ①江苏省盐城市第一人民医院 江苏 盐城 224000

    Medical Innovation of China， 2016，13(16)：004-008

    First-author's address：First People's Hospital of Yancheng City，Yancheng 224000，China

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