Apelin—13对脑缺血再灌注损伤作用的初步研究(2)
1.2 小鼠MCAO/R模型的制备 参照甄毅岚等[6]的线栓法制作左侧大脑中动脉闭塞(MCAO)模型。小鼠用7%的水合氯醛(0.05/10 g)腹腔麻醉后,仰卧位固定于手术台上,酒精擦拭颈部消毒,行颈部正中切口、钝性分离左侧颈总动脉、颈外动脉、颈内动脉。结扎颈外动脉近端,在颈总动脉近心端结扎,远心端挂线备用。微动脉夹夹住颈内动脉,在颈总动脉上于分叉处约3 mm处剪一小口,插入专用线栓,将预制的活结稍打紧(防止线栓脱出)。打开夹住颈内动脉的动脉夹,将线栓缓慢插入颈内动脉,大约9 mm时感到有一定阻力停止推进,且向外拔1mm用丝线固定,阻断大脑中动脉起始部血流且不刺破血管。伤口以碘伏消毒,缝合颈部皮肤,保留线栓3~4 mm,术后动物侧卧置于单独的笼内。缺血后60 min,缓慢向外拉线10 mm,使其头端回撤至颈总动脉内,计时实施再灌注。Saline组、Apelin-13组采用线栓法建立小鼠MCAO/R模型;sham组仅给予分离血管,不予结扎及栓塞血管。Apelin组于再灌注即刻给予同侧侧脑室注Apelin-13(0.33μg/g;注射定位:前囟左侧1 mm ......
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