1.2.2 Ⅳ型胶原包被 按参考文献[12-13]方法进行，将Ⅳ型胶原溶解于0.1%醋酸溶液中至终浓度为100 mg/L，经过滤过除菌，4 ℃保存备用。应用配制好的Ⅳ型胶原溶液2 mL平铺在培养瓶中，取配制好的Ⅳ型胶原溶液10μL涂满96孔板，置4 ℃冰箱中过夜，弃上清液，然后用0.01 mol/L PBS漂洗

    3次，洗去未贴壁多余的胶原，4 ℃干燥箱烘干，再用紫外线照射2 h消毒，得到预铺的IV型胶原培养瓶和96孔培养板。

    1.2.3 雷公藤甲素应用液制备 将雷公藤甲素粉剂溶解于DMSO液中，贮存液浓度为5 mg/mL，贮存液加入适当溶剂，制备不同浓度的实验浓液。

    1.2.4 表皮干细胞的分离与培养 将来自本院行包皮切除术的包皮皮片(患者年龄2～40岁，均无感染等相关疾病)共15例，所取皮片均得到患者知情同意，按参考文献[12-13]方法进行实验。将刚手术新鲜的标本用含青霉素、链霉素的PBS液冲洗8～10次，无菌条件下剔除皮下组织。标本剪成0.5 cm×0.5 cm的皮片，用中性蛋白水解酶4 ℃消化l4～16 h，弃上清液 ......