1.4 方法

    1.4.1 预实验确定致死剂量(LD100和LD0的确定) 适应性大鼠喂养1周。实验前禁食，正常饮水12 h。实验动物32只，分为A～H组，每组4只，大鼠尾静脉快速注射1%盐酸罗哌卡因注射液，注药速度12 mL/min，按照固定剂量法每组依次分别以37.6、32.6、27.6、22.6、17.6、12.6、7.6、2.6 mg/kg。给药后观察并记录大鼠的中毒表现及死亡情况。实验观察周期为14 d。观察指标为惊厥性收缩(抽搐)、翻正反射、运动特点的改变、死亡或存活。本预实验至最低剂量无动物死亡时即结束实验。根据死亡率LD0和LD100计算致死量[4]。

    1.4.2 正式试验求致死量的可信区间 实验动物50只，63～70 d，体重240～260 g。适应性喂养

    1周，实验前禁食但不禁饮水12 h，分五组，每组10只。根据预实验LD100和LD0的测定结果及致死情况，将LD100作为第1组剂量，LD0作为第5组试验剂量。估算出致死剂量范围在2.6～12.6 mg/kg。每相邻两组剂量均构成等比值。按照阶梯度，每组剂量分别为2.6、3.9、5.9、8.8、13.2 mg/kg ......