1.2 大鼠血管外膜成纤维细胞的原代培养 取120 g左右的SD大鼠，腹腔注射0.25%戊巴比妥那40 mg/kg麻醉，颈部脱臼处死，碘伏消毒，解剖取出胸主动脉。PBS液冲洗胸主动脉，将胸主动脉在显微镜下分离外膜，再用PBS液冲洗。将胸主动脉外膜剪成1 mm×1 mm大小的组织块，将其贴于培养瓶底部，放入培养箱中孵育6～8 d。

    1.3 大鼠血管外膜成纤维细胞的传代 待单层细胞长至铺满瓶底80%以上时进行细胞传代。细胞传代后，24 h后可见细胞重新贴壁生长，将其再传代。成纤维细胞传至4～8代后，即可用于细胞实验。

    1.4 血管外膜成纤维细胞的纯化 血管外膜经过几代生长后，成纤维细胞利用较快的生长速度达到自然纯化，得到较高纯度的成纤维细胞。

    1.5 血管外膜成纤维细胞的鉴定 采用细胞免疫荧光技术，利用Vimentin抗体和α-SMA抗体及desmin抗体鉴定细胞。Vimentin抗体阳性同时α-SMA和desmin抗体阴性，便说明为外膜成纤维细胞。

    1.6 细胞的冻存 传代后的细胞融合至80%后进行冻存。离心搜集细胞，将其放入-80 ℃冰箱中保存。

    1.7 细胞的复苏 冻存管放入37 ℃融化，将其放入培养瓶中，再放入孵箱中。

    1.8 对血管外膜成纤维细胞增殖能力影响的检测

    1.8.1 细胞实验分组 空白对照组：单纯细胞孔 ......