1.2 方法

    1.2.1 总RNA的提取 观察组患者术后切除大小为0.5 cm×0.5 cm×0.5 cm肿瘤组织，放入冻存管中进行液氮保存。对照组患者切除同样大小的癌旁正常组织块进行对照，同样方法保存。将肿瘤组织和正常组织各100 mg研磨至匀浆离心后弃去上清液，提取总RNA。采用TrizoI一步法，但在总RNA提取过程中，需要保持RAase-free進行操作，并且由同一人进行操作[6]。

    1.2.2 HMGN5基因mRNA表达水平检测 采用Real-time PCR法检测肺癌组织和癌旁正常组织，取2 μL cDNA模板和20 μL的反应体系以HMGN5和β-actin特异引物扩增相应基因，引物退火温度均为60 ℃。取2.0 μg RNA和1 μL Oligo加入离心管中，补充去离子水，将其充分混匀后，72 ℃水10 min；取出后立即放置在0 ℃冰水浴中，使模板和Oligo退火；再将其放置在42 ℃水浴中1 h ......