龚 觅 舒 丹

    DC-CIK与CIK体外培养对包含HBV基因的HepAD38细胞的杀伤效果研究*

    龚 觅①舒 丹①

    目的：研究乙型肝炎病毒抗原致敏的树突状细胞(DC)和CIK细胞共同培养后对HepAD38细胞(含整合HBV基因组)的杀伤作用。方法：从乙肝患者外周血中提取外周血单个核细胞(peripheral blood mononuclear cell，PBMC)，平均分为两组，研究组培养DC，培养DC第5天加入乙肝抗原并收获DC，然后加入CIK细胞，培养出DC-CIK细胞；对照组单独培养CIK细胞。两组在培养15 d后分别收获DC-CIK细胞与CIK细胞，同时作为效应细胞，把含有乙肝病毒的HepAD38细胞作为靶细胞，分别在5∶1、10∶1的效靶比时进行杀伤试验，使用LDH释放法测定杀伤活性，并用荧光扩增法检测杀伤试验后培养基内HBV-DNA水平。结果：研究组的DC-CIK细胞的5∶1效靶比时的平均杀伤率为(54.4±6.3)%、10∶1效靶比时的平均杀伤率为(71.5±4.5)%，均明显高于对照组CIK细胞的(42.4±3.0)%、(59.4±4.5)%，差异均有统计学意义(P<0.05)。研究组的DC-CIK细胞5∶1效靶比时的培养基内的HBV-DNA平均为(1.20±0.30)×106/mL、10：1效靶比时的培养基内的HBV-DNA平均为(1.64±0.60)×107/mL，均明显高于对照组CIK细胞的(0.90±0.23)×106/mL、(1.28±0.23)×107/mL，差异均有统计学意义(P<0.05)。结论：CIK细胞与DC-CIK细胞对HepAD38细胞均具有杀伤效果，而且随着效靶比的升高，杀伤效果增强。同时，乙肝抗原致敏的DC诱导出的特异性CIK细胞(DC-CIK细胞)，能够有效提高CIK细胞对乙肝病毒感染的HepAD38细胞的杀伤作用，其杀伤作用可能与DC被乙肝抗原致敏后诱导出特异性CIK，增强各自疗效有关。

    DC； CIK； HepAD38； 效果

    慢性乙型肝炎病毒(hepatitis B virus，HBV)感染是世界范围性质的疾病问题，其中我国是HBV感染的主要国家之一[1]，HBV容易发展成为慢性乙型病毒性肝炎(chronic hepatitis B virus，CHB)，而CHB则会发展为肝硬化或者肝癌，一直以来是我国乃至世界人民生命威胁的传染病之一。国内HBV感染多数在围产期或幼年时期发生，因此易产生免疫耐受，体内病毒清除困难，长期的慢性感染还会导致出现各种并发症，因此如何清除HBV是CHB治疗的重难点 ......