烟草烟雾暴露对气道上皮细胞转分化改变的初探(3)
2 结果2.1 不同梯度浓度CSC刺激下16HBE细胞活性检
测 实验第一步:首先从较宽浓度(5×10-3~50 μg/mL)
筛选出对细胞有效影响范围浓度。由表1可见,CSC在5 μg/mL对16HBE细胞有明显促增殖作用(F=274.61,P<0.05),在50 μg/mL对其活性有显著抑制作用(F=94.10,P<0.05),因此进一步细化有效刺激浓度,范围在5~50 μg/mL,刺激7 d后再行CCKit-8检测。实验第二步:从细化后的有效刺激浓度筛选出最佳刺激浓度。由表2可见,CSC在10 μg/mL时OD值达到峰值(F=122.69,P<0.05),在此峰值以后OD值下降(F=298.65、445.28、401.18,P<0.05),故将10 μg/mL作为最佳刺激浓度用于后续实验研究。
2.2 CSC刺激后16HBE形态学检测 经倒置显微镜下观察,对照组16HBE呈现上皮细胞典型的铺路石状形态,细胞间紧密连接,其形态是立体的,稍微凸起的,见图1;而经10 μg/mL CSC刺激7 d后,16HBE细胞间连接明显减少,部分细胞形态发生改变,变为长梭形、多角形或星形,见图2(刺激组中选取EMT样改变最典型区域) ......
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